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PCR能干什么?通蔚3分钟带您快速了解

发布时间:2024-12-30     发布作者:上海通蔚生物

  聚合酶链式反应(PCR)是一种分子生物学技术,用于扩增DNA(脱氧核糖核酸)序列。科研人员可以借用PCR能够复制特定的DNA区域使其成为遗传学、基因组学、微生物学、法医学和医学诊断学等各个领域的重要工具。接下来,上海通蔚为大家介绍下PCR及何时用到PCR。

  什么是PCR


  聚合酶链式反应(PCR)是一种常见的实验室技术,用于复制特定DNA区域的多个副本(数百万或数十亿)。这个DNA区域可以是实验者感兴趣的任何内容。例如,它可能是研究人员想要了解其功能的基因,或者是法医科学家用来将犯罪现场DNA与嫌疑人进行匹配的基因标记。

  通常,PCR的目的是获得足够多的目标DNA区域,以便对其进行分析或以其他方式使用。例如,PCR扩增的DNA可以送去测序、通过凝胶电泳进行可视化,或克隆到质粒中以供进一步实验。

  PCR应用于生物学和医学的许多领域,包括分子生物学研究、医学诊断,甚至生态学的一些分支。

  PCR步骤


  PCR反应的关键成分是Taq聚合酶、引物、模板DNA和核苷酸(DNA构建块)。这些成分与酶所需的辅因子一起组装在试管中,并经过反复加热和冷却循环,以合成DNA。

  基本步骤如下:

  1.变性(96°C):强烈加热反应物以分离或变性DNA链。这为下一步提供了单链模板。

  2.退火(55-65°C):冷却反应,以便引物可以与单链模板DNA上的互补序列结合。

  3.扩增(72°C):提高反应温度,使Taq聚合酶延伸引物,合成新的DNA链。



PCR步骤

  循环往复25-35典型的PCR反应通常需要2-4数小时,具体取决于被复制的DNA区域的长度。如果反应高效(效果良好),目标区域的复制量可以从一个或几个增加到数十亿个。

  这是因为每次用作模板的不仅仅是原始DNA。相反,在一轮中生成的新DNA可以作为下一轮DNA合成的模板。反应中有许多引物的副本和许多Taq聚合酶分子,因此DNA分子的数量在每一轮循环中大约可以翻倍。下图显示了这种指数增长模式。



PCR扩增

  PCR应用


  使用PCR,DNA序列可以扩增数百万或数十亿次,产生足够的DNA拷贝,可以使用其他技术进行分析。例如,DNA可以通过凝胶电泳可视化,送去测序,或用限制性酶消化并克隆到质粒中。

  PCR在许多研究实验室中都有使用,在法医学、基因检测和诊断方面也有实际应用。例如,PCR用于从患者的DNA(或在产前检测中从胎儿DNA)中扩增与遗传疾病相关的基因。PCR还可用于检测患者体内的细菌或DNA病毒:如果存在病原体,则可能从血液或组织样本中扩增其DNA区域。

  PCR作为分子生物学,用于扩增DNA(脱氧核糖核酸)序列。而PCR技术为生命科学研究带来更多的成果。这些成果涉及到医学,生物学、法医和食品各个领域。了解PCR,助力生命科学研究。