发布时间:2024-01-23 发布作者:上海通蔚生物
抗原抗体反应或抗原抗体相互作用是免疫反应过程中白细胞B细胞产生的抗体与抗原之间发生的一种特殊的化学相互作用。凝集过程结合了抗原和抗体。
这是身体用来防御各种外来颗粒(如病毒及其有毒化学物质)的基本生物过程。当抗体与抗原特异性且强烈地结合时,血液中会形成抗原-抗体复合物。免疫复合物随后被转移到细胞系统中,在那里它可以被消除或失活。
(Anti=相反;gen=导致的任何事物)
免疫原是任何外来物质,一旦进入我们的身体,通常会引起一系列免疫反应。而其他分子(称为半抗原)则需要其他分子(载体蛋白)的帮助才能激活免疫反应。所有的免疫原和半抗原都称为抗原。
抗体是免疫系统响应抗原而产生的成分。因此,抗原导致抗体的产生。它们共同作用以表现出免疫反应。抗体的一般特征如下:
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抗原和抗体彼此特异性结合。抗原抗体反应是用于描述它们之间相互作用的术语。Ag-Ab反应是它的常见缩写。它们是体液或抗体介导的免疫的基础。
这些反应是检测特异性和非特异性抗原(例如引起非特异性疾病的酶)的基础。体外发生的血清学反应称为Ag-Ab反应。
Ag和Ab之间的相互作用分为三个阶段。
亲和力:它是一个比亲和力更普遍的概念。它代表Ag-Ab复合物的总强度。这取决于:
1.抗体的亲和力
2.抗体和抗原价(结合位点的数量)
3.表位和互补位的结构排列方式。
交叉反应性:该术语描述抗体与其他抗原上的相似表位结合的能力。
抗原抗体反应的类型如下:
当可溶性Ag与其Ab在特定pH值和温度下、电解质(NaCl)存在下结合时,会产生Ag-Ab复合物的不溶性沉淀。沉淀素是引起沉淀的抗体,该反应称为沉淀反应。
沉淀反应发生在液体和凝胶介质中。
复杂的Ag或Ab制剂中会出现多个条带。它们分为两种方法:单扩散和双扩散。
当某种银与其抗体在适当温度和pH值的电解质存在下结合时,颗粒会聚集或凝集。由血清抗体形成的细胞Ag团块称为凝集素。
凝集原是聚集颗粒抗原的名称。
保留不含抗血清的对照管。将管孵育直至可观察到凝集。表现出最高凝集的试管称为滴度。
载体颗粒表面涂有银,有助于将沉淀过程转变为凝集反应,从而使反应更加灵敏。红细胞、乳胶颗粒或膨润土可用作载体颗粒。有时,可能会使用晒黑的红细胞(聚苯乙烯涂层红细胞)。
红细胞或微生物的裂解需要一些非特异性、不稳定的新鲜血清成分(称为补体)。
每个人都有构成补体系统的11种蛋白质。它们附着在Ag-Ab复合物中Ab的Fc亚基上。补体固定测试利用Ag-Ab复合物固定补体的能力。
第一步,将测试抗原和抗血清加热至56°C以灭活补体,并与已知量的补体结合。将其在4°C下孵育18小时。
如果血清中含有针对Ag的特异性抗体,则会形成Ag-Ab复合物并固定补体。
荧光是吸收特定波长的光线并发射不同波长的光线的能力。
当暴露于紫外线辐射时,荧光染料会发出强烈的可见光。
1942年,Albert Coons及其同事演示了标记染料如何与抗体偶联,从而可以使用这些标记染料检测抗原。
常用的染料包括:
免疫荧光操作中最常用的标记是荧光素,这是一种吸收蓝光(490 nm)并发出强烈黄绿色荧光(517 nm)的有机染料。
作为强烈的红色荧光发射体和有效的光吸收剂(比荧光素有效30倍),藻红蛋白通常用作免疫荧光的标记物。
ELISA–酶联免疫吸附测定
1971年,酶标记的Ag和Ab被创建为用于检测抗体和抗原的血清学试剂。
与放射免疫分析(RIA)相比,它们更简单、灵敏、价格实惠且无风险。
所使用的配体是与过氧化物酶、β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶等酶共价连接的分子,并且能够检测抗体。
ELISA共有三种类型:
间接ELISA:可以使用间接ELISA方法检测HIV。微量滴定板的表面涂有利用重组技术开发的包膜蛋白。当添加可疑血清时,未结合的蛋白质被洗掉。
夹心ELISA:该方法用于确定样品中是否存在Ag。在孔涂有Ag特异性抗体后,添加可疑血清并给予反应时间。通过清洗将未结合的Ag从孔中去除。
下一步是针对不同的Ag表位添加标记的Ab。洗涤用于去除未结合的抗体,然后添加有色底物并显色。颜色强度与血清中的Ag浓度成正比。
竞争性ELISA:竞争性ELISA是估计抗原浓度的另一种变体。在此方法中,抗体最初在溶液中与含有抗原的样品一起孵育。
然后用抗原-抗体混合物填充抗原包被的微量滴定孔。
当样品中存在更多抗原时,可附着在抗原包被孔上的游离抗体将会减少。在间接ELISA中,添加涂有针对一抗同种型的酶的二抗(Ab2),可用于估计每个孔中附着的一抗数量。
因此,我们通过对抗原抗体反应的简要概述来结束本次讨论。抗体和抗原之间的特异性相互作用导致组合,称为抗原-抗体反应或抗原-抗体相互作用。
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Q1
抗原有哪三种类型?
抗原可分为三类。外源性(宿主免疫系统的外来物)、内源性(由宿主细胞内繁殖的内部细菌和病毒产生)和自身抗原(由宿主产生)是描述抗原的三种基本技术。
Q2
抗原是由什么组成的?
肽、蛋白质和多糖组成抗原。抗原可以是细菌或病毒的任何成分,包括涂层、表面蛋白、毒素、荚膜和细胞壁。
Q3
抗体有哪五种类型?
根据构成这些区域的五种不同类型的链恒定区,抗体(免疫球蛋白)分为IgG、IgM、IgA、IgD和IgE。它们分布在全身各处并具有多种功能。