elisa试剂盒怎么选？这6个方法让您少走弯路！

  ELISA是实验室里一项最基本的免疫检测技术，被广泛应用科研、医疗、食品和环境等领域。面对市场琳琅满目试剂盒及数百家供应商，对于刚进入实验室的新手或者准备开展ELISA实验人员，如何选择一款合适的ELISA试剂盒呢？下面我们从elisa类型、实验物种及待检样品、样品中检测物水平、样本可获得性、试剂盒关键性技术参数和预算。

  目录：

  1.ELISA类型

  2.实验物种及待检样品

  3.样品中检测物水平

  4.样本可获得性

  5.试剂盒关键性技术参数

  6.预算

  一、ELISA类型

  在进行ELISA实验时，首要是明确ELISA类型。实验人员可以结合自己待检测物来明确试剂盒类型。一般试剂盒类型分为直接法、间接法、竞争法和双抗体夹心法。下面详细介绍：

  1.直接法：直接ELISA步骤最少，常用于分析对抗原的免疫反应。

  2.间接法:间接ELISA是一个两步过程，最适合确定样本中的总抗体浓度。

  3.夹心ELISA（适用于大蛋白）利用匹配的抗体对，灵敏度比间接或直接ELISA高2-5倍。用于分析复杂样品，因为抗原在测量前不需要纯化。

  4.竞争性ELISA（适用于小蛋白质）最适合检测不能被两种不同抗体结合的小抗原，例如夹心ELISA技术。

  二、实验物种及待检样品

  如果实验对象是人、小鼠及大鼠比较常见物种，选择一个合适的试剂盒相对容易一些。如果检测样品比较稀有的鸡、牛、猴物种，市面上还是比较少。如果需要的话，最好要对待检物（如有种属差异性）进行同源性分析以及试剂盒的种属交叉反应数据。

  对于样品类型而言，一般的商业化试剂盒在正式上市销售之前都经过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。

  在选择试剂盒之前，最好是详细阅读说明书。因为在某些情况下样品会存在感染因素。例如溶血血浆、含有高脂肪的样本、细胞培养液或人抗属抗体中含有胎牛血清等。通过阅读供应商说明书或直接进行咨询。如果您的样品为组织和细胞裂解物，则需要谨慎的选择试剂盒。

  三、样品中检测物水平

  为了降低目标蛋白之外的其他成分（例如盐离子、脂类、其他蛋白质等），一般建议至少进行2倍稀释，也就是将1份样品与1份稀释液混合。如果对样品浓度范围没有概念，最好先做预实验，测试不同稀释倍数下的结果，找到最佳稀释倍数。除此之外，样品中待检测物含量远超试剂盒检测范围（标曲范围），需要根据样品中目标蛋白的大概浓度和试剂盒的检测范围，选择合适的稀释倍数。最后计算结果时，需要将测得的数值乘以相应的稀释倍数，才能得到样品中目标蛋白的真实浓度。

  四、样本可获得性

  一般而言，商业化试剂盒的样本用量都在50ul或100ul，但也有一些供应商的试剂盒样品用量要求可少至于10ul。如果您待检测样品比较难获取，则需认证考虑试剂盒对样品用量的需求。如果样品本身就比较少，且需要做多因子检测时更需要谨慎选择。

  五、试剂盒关键性技术参数

  ELISA试剂盒关键的技术参数包括板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及交叉反应性、回收率等。如果经常开展ELISA实验，建议使用同一厂家试剂盒，这样可以保证实验数据的可比性和重复性。

  六、预算

  预算是选购ELISA试剂盒比较关键的环节。国际公认知名品牌（进口试剂盒）质量比较可靠，文献引用较多。由于知名品牌（进口）运输成本较高，试剂盒价格也较高。对于国内优质品牌试剂盒也是不错的选择，因因省去不少物流和报关中间费用，与进口试剂盒价格上相比也有较大的优惠，而且能够提供灵活的包装规格，比较适合国情。

  以上就是通蔚为大家介绍ELISA试剂盒选择方法，广大科研人员选择试剂盒务必仔细研究，谨慎购买。如果您对ELISA试剂盒还有疑问，欢迎前来咨询通蔚试剂盒顾问。