酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的血清学检测方式。今天由小蔚为大家详解酶联免疫吸附实验的工作原理及应用。了解酶联免疫吸附实验(ELISA)如何检测血清。
ELISA血清学检测法通常在多孔微量板中进行,这样可以很方便进行血清的稀释和检测。为了更好的理解ELISA工作原理,我们来仔细看看,在检测时多孔板的其中的一个孔中发生什么。
在进行检测前,先用目标抗原包被多孔板的每个孔(对于商业化的检测),制造商会把这个步骤做好。
elisa检测试剂盒
首先,在开始检测时,我们会在测试孔中加入稀释过的患者血清。如果病人血清中有相应的
抗体,它们会与固定在孔底的抗原结合,只有抗原特异性抗体才会固定在孔中。
接着(用缓冲液)清洗这些孔,将所有未集合的抗体去除。然后,加入含有动物抗体的溶液(这里的动物抗体能够抗人类的抗体)。这第二种抗体(动物抗体)上共价结合了一个酶。再次清洗这些孔,这次是为了清除去未结合的酶标记抗体。
最后,加入一种显色溶液,这种溶液含有一种可以被酶催化显色的底物。底物与第二种抗体上的酶相互作用。可以使溶液呈现明显的颜色。可以通过肉眼观察或仪器定量读取每个孔中特定抗体的显示结果。
随着血清不断稀释,和抗原结合的抗体量就会减少,反应的颜色也会越来越淡,能出现显色反应的最高稀释倍数就是所测样品的特价。
上文是上海通蔚为大家介绍酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清的原理及应用,您对血清检测原理了解多少呢?在进行酶联免疫吸附实验过程要遵循说明书和注意事项,确保实验结果的准确性。