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大鼠 ELISA 试剂盒购买必读:全方位解读与精选推荐

发布时间:2024-07-16     发布作者:上海通蔚生物

  在现代生物医学研究,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术因其高效、灵敏和特异性强的特点,广泛应用于各种生物分子的检测。而大鼠ELISA试剂盒作为其中的重要工具,能够帮助科研人员和专业人员精确测定大鼠血清、血浆、组织匀浆等样本中的特定蛋白质、激素和抗体水平。这些数据对于疾病机制研究、新药开发及食品安全检测等领域具有重要意义。

  本文旨在为科研人员提供一份详细的大鼠ELISA试剂盒选购指南。通过介绍大鼠ELISA试剂盒、选购时需考虑的关键因素和说明,帮助您选择最合适的试剂盒,从而顺利完成实验,获取可靠的数据支持您的研究和检测工作。

  什么是大鼠ELISA试剂盒


  大鼠ELISA试剂盒是一种专门用于检测大鼠样本(如血清、血浆、组织匀浆等)中特定抗原或抗体的工具。大鼠ELISA试剂盒工作原理采用是“双抗体夹心ELISA”法。双抗体夹心ELISA技术利用两种特异性抗体(捕获抗体和检测抗体)来夹住目标抗原,从而实现高灵敏度和高特异性的检测。

  大鼠elisa试剂盒实验原理


  例如检测大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)。试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠髓鞘碱性蛋白(MBP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

  大鼠ELISA试剂盒因其高灵敏度和高特异性,在生物学、临床前、食品安全检测和环境科学研究发挥了重要作用,帮助科研人员和专业人员获取精确可靠的数据,推动科学研究和实际应用的发展。


  大鼠ELISA试剂盒选择


  为大鼠ELISA试剂盒的选购提供详细的指导,涵盖以下几个方面:指标选择、品牌选择、价格和质量以及实验条件。

  1.指标选择

  在选购大鼠ELISA试剂盒时,首先需要明确实验要检测的目标分子(指标)。常见的检测指标包括:

  细胞因子:如IL-6、TNF-α、IFN-γ等,用于研究免疫反应和炎症。

  激素:如胰岛素、皮质醇等,用于内分泌和代谢研究。

  蛋白质:如血清蛋白、转铁蛋白等,用于生理和病理状态研究。

  抗体:如IgG、IgM等,用于感染和免疫状态评估。

  选择合适的指标有助于准确地回答研究问题,并获取可靠的数据。

  2.品牌选择

  选择信誉良好的品牌可以确保试剂盒的质量和稳定性。如上海通蔚,上海通蔚拥有15年以上的ELISA试剂盒生产经验,搭建了ELISA试剂盒开发和成熟抗原-抗体系统的良好平台。

  3.价格和质量

  价格和质量是选购ELISA试剂盒时需要综合考虑的因素:

  价格:高质量的试剂盒通常价格较高,但提供的结果更可靠。对于预算有限的研究,可以考虑性价比较高的品牌和产品。

  质量:选择质量可靠的试剂盒可以减少实验误差和重复实验的成本。可以通过查看用户评价、参考文献和厂商的质控标准来评估试剂盒的质量。

  4.实验条件

  确保所选试剂盒适用于实验室的具体条件和设备:

  样本类型:确认试剂盒适用于实验所使用的样本类型(如血清、血浆、组织匀浆等)。

  检测范围和灵敏度:选择检测范围和灵敏度符合实验需求的试剂盒,确保能够检测到样本中的目标分子。

  实验步骤和时间:考虑试剂盒的操作步骤和所需时间,选择操作简便且时间可控的试剂盒。

  设备兼容性:确认试剂盒适用于实验室现有的设备(如酶标仪、洗板机等)。


  大鼠ELISA试剂盒使用说明


  实验流程

  1.准备工作:

  所有试剂和样本应在使用前达到室温(20-25°C)。

  按照说明书准备所有标准品和样本稀释液。

  2.包被微孔板:

  将预先包被捕获抗体的微孔板从包装中取出。

  在每个孔中加入标准品、样本或对照,每个样本建议至少做重复测定。

  3.孵育:

  盖上微孔板盖,静置孵育(通常在37°C孵育1-2小时,具体时间参照试剂盒说明书)。

  4.洗涤:

  用洗涤液洗涤微孔板,去除未结合的样本和标准品,通常洗涤3-5次。

  5.加入检测抗体:

  在每个孔中加入检测抗体,盖上盖子孵育(通常在37°C孵育1小时)。

  6.再次洗涤:

  用洗涤液再次洗涤微孔板,去除未结合的检测抗体。

  7.加入酶标记二抗:

  在每个孔中加入酶标记的二抗,盖上盖子孵育(通常在37°C孵育30分钟)。

  8.第三次洗涤:

  用洗涤液第三次洗涤微孔板,去除未结合的酶标记二抗。

  9.加入底物溶液:

  在每个孔中加入底物溶液,孵育(通常在室温避光孵育15-30分钟,直到颜色变化明显)。

  10.终止反应:

  在每个孔中加入终止液,颜色会由蓝色变为黄色。

  11.读取结果:

  使用酶标仪在450nm波长(可选630nm作为参比波长)读取每个孔的光吸收值(OD值)。

  注意事项

  1.样本处理:

  确保样本不含颗粒物,否则应离心去除沉淀。

  样本应避免反复冻融,以防影响结果。

  2.操作细节:

  操作时应避免气泡进入孔中,以免影响读数。

  每次孵育结束后要彻底洗涤,以减少非特异性结合。

  3.试剂保存:

  未用完的试剂应按说明书要求保存,避免污染。

  4.实验室条件:

  保持实验室环境清洁,避免试剂和样本污染。

  实验操作应遵循无菌操作规范。

  数据分析

  1.标准曲线绘制:

  使用标准品的OD值,绘制标准曲线(OD值对标准品浓度)。

  标准曲线通常采用四参数逻辑回归或线性回归模型进行拟合。

  2.样本浓度计算:

  根据样本的OD值,利用标准曲线计算样本中目标分子的浓度。

  确保样本的OD值在标准曲线的线性范围内,必要时进行样本稀释。

  3.重复性和可靠性:

  计算重复样本之间的变异系数(CV值),评估实验的重复性。

  对于每个样本进行至少两次独立测定,确保结果可靠。

  4.结果验证:

  通过与已知值或参考值的比较,验证实验结果的准确性。

  通过上述步骤和注意事项,您可以有效地使用大鼠ELISA试剂盒进行实验,获得可靠的数据以支持您的科研工作。由于实验指标不同,可以参考当前说明书进行大鼠ELISA实验工作。

  上述通蔚为大家介绍了大鼠ELISA试剂盒及选购方面的介绍,本文内容有限,如果详细了解大鼠ELISA试剂盒,可以咨询通蔚在线ELISA顾问,为您更好推荐大鼠ELISA试剂盒,提高您在科研实验可靠的数据。