发布时间:2024-04-25 发布作者:通蔚生物
酶联免疫试剂盒,全称为酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay)试剂盒,是一种灵敏、特异的生物分析技术,用于检测抗原或抗体的生物试剂。在科研实验中,ELISA试剂盒起着比较关键作用,它可以帮我深入研究各种生物学现象,推动科研进步!
在ELISA实验中或者选择购买ELISA试剂盒,了解ELISA试剂盒组成部分及作用比较重要!接下来上海通蔚生物详细为大家介绍一下ELISA试剂盒组成部分及作用,帮助您更好了解这些部分在ELISA实验的作用及在今后选择合适的ELISA试剂盒。
在了解ELISA试剂盒组成之前,我们先了解下ELISA实验原理。在ELISA实验中,抗原或抗体被固定在固相载体(如微孔板)上。其次,加入待检测样本,其中的抗原或抗体会与固定在载体上的抗原或抗体发生特异性结合。接着,实验中会引入酶标记的二抗。这些二抗能够识别并结合已经与待检测分子结合的抗体,形成抗原-抗体-酶标二抗复合物。最后,加入底物后,酶标二抗中的酶会催化底物发生化学反应,产生可见的颜色变化。
图1 通蔚ELISA试剂盒
知道原理,我们就详细了解下ELISA试剂盒组成,因为原理包含了实验用到试剂盒部分,ELISA试剂盒包含如下:
酶标板(微孔板)
酶标板是由多孔组成(96孔),每个孔都有一个潜在窗口,可以透视您的样本。酶标板,材质一般为聚苯乙烯,在酶联免疫实验中,抗原、抗体和其它生物分子通过多种机制吸附至酶标板表面,然后与受检样本和酶标抗原或抗体按不同的步骤进行反应,通过酶标仪来进行检测。
图2 96孔酶标板
抗原和抗体
抗原和抗体是ELISA试剂盒关键生物分子,抗原和抗体在酶标板特异性结合反应解决生物学科研难题。
酶标记抗体
酶标记抗体是链接特异性抗原识别和信号放大桥梁。它能够识别并结合样品中目标抗原上的特定抗原表位,并偶联一种酶(例如辣根过氧化物酶 HRP 或碱性磷酸酶 AP),加入底物,酶会催化底物发生反应,产生可检测的信号。
缓冲液
为了提高实验的可靠性,减少背景干扰。缓冲液有包被缓冲液、封闭缓冲液、样品稀释缓冲液、洗涤缓冲液和终止缓冲液。不同的缓冲液其作用也不同,大家可以参考自己购买试剂盒的说明进行实验应用。
底物
底物是实验最后阶段,它和没标记抗体反应时,实验的结果将在酶标板上显出色彩和荧光剂。
图3 底物显色
终止液
加入底物发挥作用之后,您需要一个方法停止反应,防止信号增强可能会同时放大背景信号,降低信噪比,从而影响检测结果的准确性。终止液可以结束实验。
阳性和阴性对照样品
为了保证ELISA实验的准确性,ELISA试剂盒还为您提供了已知浓度的阳性和阴性对照样品,以帮助您得出实验并验证结果。
说明书
ELISA试剂盒说明书可以为您实验操作和注意事项进行指导,确保您实验的完整性和准确性。
一个完整的ELISA试剂盒基本上包含上述的组成,大家拿到试剂盒可以了解这些组成部分。不过大家在选择试剂盒时候要注意以下事项:
首先,仔细阅读试剂盒的说明书是至关重要的。了解试剂盒的选用方法、组成、方法性能指标等信息有助于选择最适合实验需求的试剂盒。对于科研工作,应选择参考方法试剂盒;而在医疗预防工作中,建议选择推荐的常规方法试剂盒或公认的测定方法试剂盒。
其次,注意检查试剂盒是否有卫生部的批准文号。对于已列入卫生部临床检验体外诊断试剂审批管理范围的试剂盒,没有生产批准文号的,不应使用。同时,考察生产厂家的信誉也是必要的,以确保试剂盒的质量和稳定性。
最后,根据实验规模和预算合理选择试剂盒也是关键。不同品牌和类型的试剂盒价格可能存在差异,因此需要根据实际情况进行选择。对于实验规模较大的情况,可以选择通用的试剂盒以降低成本;而对于实验规模较小的情况,可以选择专用的试剂盒以提高检测的准确性和特异性。
了解酶联免疫试剂盒组成及作用,作为科研的小伙伴们让我们充分利用ELISA为科学进步和人类发展造福!对于ELISA试剂盒还有疑问,可以寻求通蔚ELISA在线顾问咨询。通蔚有不同物种的ELISA试剂盒满足科研需求,高灵敏度和特异性,活动优惠多多,欢迎前来选购!