【通蔚生物】: BCA法-总蛋白操作原理步骤

通蔚生物带您了解BCA法-总蛋白是如何操作的有哪些原理呢？

原理BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性.检测浓度下限达到25微克1毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为120微升。

BCA法-总蛋白以下操作步骤
一.标准曲线的绘制:各管 按照下表加入试剂孔号01234567蛋白标准溶液( μL) 05 10 2040 6080 100去离子水( uL) 100 95 90 80 604020 0对应蛋白含量( μg) 02.55.10.0 20.0 30.0 40.0 50.0
二.根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B ( 50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀：
三.各管充分混匀，37C放置 30分钟，然后在562nm下比色测定。以蛋白含量( μg)为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线：
四.稀释待测样品至合适浓度，样品稀释液总体积为100 ul，加入bca工作液1000μL，充分混匀，37C放置 30分钟后，以标准曲线0号管做参比，在562nm波长下比色，记录吸光值

BCA法-总蛋白先按说明书清点试剂盒里的试剂和物品，然后进行标曲稀释和BCA工作液的配制，之后以血清样本为例，进行实验。整个过程包括标曲稀释，试剂准备，样本准备，实验操作，仪器检测以及数据处理。