上文提到到基本培养基DMEM,这种培养基在实验室应用比较广泛。今天,上海通蔚生物来说下RPMI-1640培养基,它和DMEM培养基都属于体外培养哺乳动物细胞的基础培养基。通过RPMI-1640培养基的历史由来、成分和DMEM区别来详解。
RPMI-1640培养基的历史由来
RPMI1640,简称RPMI培养基,是一种常用于培养哺乳动物细胞的细胞培养基。 RPMI1640由GeorgeE.Moore、RobertE.Gerner和H.AddisonFranklin于1966年在罗斯威尔公园综合癌症中心(前身为罗斯威尔公园纪念研究所)开发,并由此得名。 McCoy5A培养基(或RPMI1630)的改良版,最初配制用于支持悬浮培养中的类淋巴母细胞,但也可以支持多种贴壁细胞。
RPMI-1640培养基成分组成
RPMI-1640培养基的成分组成相当丰富,主要包括以下几类:
1.氨基酸:
必需氨基酸:L-精氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酰胺、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸
非必需氨基酸:L-丙氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸
2.维生素:
生物素、叶酸、烟酰胺、泛酸、吡哆醇、核黄素、硫胺素、维生素B12、胆碱、肌醇、维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K
3.无机盐和微量元素:
氯化钙、氯化钾、氯化镁、氯化钠、磷酸氢二钠、硫酸钠、硝酸铁、硫酸锌、硫酸铜、钼酸钠、硒酸钠
4.其他成分:
葡萄糖:提供细胞能量来源
酚红:pH指示剂,颜色随pH值变化而变化
碳酸氢钠:缓冲系统的一部分,维持培养基pH值稳定
5.可选成分:
丙酮酸钠:额外的能量来源
HEPES:另一种缓冲剂,可在无CO2环境中使用
牛血清或其他血清:提供生长因子、激素和其他细胞生长所需的物质
RPMI-1640培养基和其它培养基区别在那里
RPMI-1640培养基与其他常用培养基(如DMEM、MEM等)在成分、应用和培养条件等方面存在一些区别:
1.营养成分:
葡萄糖浓度:RPMI-1640的葡萄糖浓度(2g/L)比DMEM(1g/L)和MEM等培养基更高,更适合于快速生长的细胞,例如淋巴细胞。
氨基酸:RPMI-1640包含更多种类和更高浓度的氨基酸,尤其是非必需氨基酸,使其更适合于对营养要求较高的细胞。
维生素:RPMI-1640也含有更高浓度的维生素,例如B族维生素。
2.缓冲系统:
RPMI-1640:主要使用碳酸氢盐缓冲系统,需要在含5%CO2的环境中才能有效维持pH值稳定。
DMEM和MEM:通常使用HEPES缓冲系统,可以在无CO2环境中维持pH值稳定。
3.应用:
RPMI-1640:更常用于培养悬浮细胞,例如淋巴细胞、杂交瘤细胞和一些白血病细胞系,也适用于一些贴壁细胞。
DMEM:更常用于培养贴壁细胞,例如成纤维细胞、上皮细胞等。
MEM:适用于多种细胞类型,包括贴壁细胞和悬浮细胞。
4.其他区别:
渗透压:RPMI-1640的渗透压略高于DMEM和MEM。
无机盐:RPMI-1640含有更高浓度的某些无机盐,例如磷酸盐和硫酸盐。
选择培养基的考虑因素
细胞类型:不同细胞类型对营养物质的需求不同。
实验目的:例如,研究细胞生长或代谢可能需要不同的培养基。
培养条件:是否需要CO2培养环境。
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