发布时间:2024-09-02 发布作者:上海通蔚生物
ELISA可以应用疾病诊断测定,用于识别血液中是否存在特定抗原或抗体。在微孔板上进行的ELISA实验操作。它使用与易于测定的酶连接的抗体。血清样本中的抗原与与酶连接的特定抗体结合。在最后一步中,添加特定底物与酶发生反应。酶将底物转化为有色或产生信号的产物。化学底物的颜色变化揭示了血清样本中特定抗体的存在。直接ELISA测试仅使用与酶连接的一抗。与抗原结合后,它会迅速改变颜色,表明血液中存在传染性病原体。但是,由于表位仅限于抗原结合,因此直接ELISA中的信号强度较弱。因此,与间接ELISA相比,直接ELISA的灵敏度较低。
ELISA可以使用两种类型的抗体进行,即:一抗和二抗。间接ELISA 使用两种类型的抗体来放大信号以便更好地检测。抗原通过孵育被动附着到孔上,洗涤后,将抗原特异性抗体(一抗)与抗原一起孵育。清洗孔并通过添加与酶共价连接的抗物种抗体(二抗)来检测结合的抗体。二抗对于产生所添加的第一抗体的物种具有特异性。间接ELISA比直接ELISA更灵敏。然而,由于二抗的交叉反应,间接ELISA可能会产生非特异性信号。
直接ELISA与间接ELISA区别 |
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与间接 ELISA 相比,直接 ELISA 的灵敏度较低。 |
间接 ELISA 灵敏度更高。 |
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花费时间 |
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直接 ELISA 测试是一个快速的过程。 |
间接 ELISA 比较耗时。 |
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抗体使用 |
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直接 ELISA 仅使用一种抗体(一抗)。 |
间接 ELISA 需使用一抗和二抗。 |
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与酶的联系 |
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一抗与酶相连。 |
二抗与酶相连。 |
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第二抗体的交叉反应 |
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直接 ELISA 消除了二抗的交叉反应。 |
间接 ELISA 会受到二抗交叉反应的影响。 |
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信号 |
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与间接 ELISA 相比,信号较弱。 |
间接ELISA法中信号被放大,因此很容易检测。 |