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直接和间接 ELISA 之间的差异

发布时间:2024-09-02     发布作者:上海通蔚生物

  酶联免疫测定( ELISA ),也称为酶免疫测定,是定量生物分子(如肽、蛋白质、抗体和激素)的黄金标准技术。ELISA检测有两种类型:直接ELISA和间接ELISA。直接和间接ELISA之间的主要区别在于间接ELISA更敏感并且需要添加二抗,而直接ELISA敏感度较低并且仅使用一抗。

  什么是直接ELISA?


  ELISA可以应用疾病诊断测定,用于识别血液中是否存在特定抗原或抗体。在微孔板上进行的ELISA实验操作。它使用与易于测定的酶连接的抗体。血清样本中的抗原与与酶连接的特定抗体结合。在最后一步中,添加特定底物与酶发生反应。酶将底物转化为有色或产生信号的产物。化学底物的颜色变化揭示了血清样本中特定抗体的存在。直接ELISA测试仅使用与酶连接的一抗。与抗原结合后,它会迅速改变颜色,表明血液中存在传染性病原体。但是,由于表位仅限于抗原结合,因此直接ELISA中的信号强度较弱。因此,与间接ELISA相比,直接ELISA的灵敏度较低。

间接ELISA


  什么是间接ELISA?


  ELISA可以使用两种类型的抗体进行,即:一抗和二抗。间接ELISA 使用两种类型的抗体来放大信号以便更好地检测。抗原通过孵育被动附着到孔上,洗涤后,将抗原特异性抗体(一抗)与抗原一起孵育。清洗孔并通过添加与酶共价连接的抗物种抗体(二抗)来检测结合的抗体。二抗对于产生所添加的第一抗体的物种具有特异性。间接ELISA比直接ELISA更灵敏。然而,由于二抗的交叉反应,间接ELISA可能会产生非特异性信号。

直接ELISA


  直接ELISA与间接ELISA区别


直接ELISA与间接ELISA区别

与间接 ELISA 相比,直接 ELISA 的灵敏度较低。

间接 ELISA 灵敏度更高。

花费时间

直接 ELISA 测试是一个快速的过程。

间接 ELISA 比较耗时。

抗体使用

直接 ELISA 仅使用一种抗体(一抗)。

间接 ELISA 需使用一抗和二抗。

与酶的联系

一抗与酶相连。

二抗与酶相连。

第二抗体的交叉反应

直接 ELISA 消除了二抗的交叉反应。

间接 ELISA 会受到二抗交叉反应的影响。

信号

与间接 ELISA 相比,信号较弱。

间接ELISA法中信号被放大,因此很容易检测。


  ELISA是一种生化技术,主要用于免疫学,可以用来检测生物分子(如肽、蛋白质、抗体和激素)。它可以通过两种过程进行,即直接或间接ELISA。直接ELISA测试仅使用一抗来检测抗原,而间接ELISA同时使用一抗和二抗。在直接ELISA中,一抗被标记,而在间接ELISA中,二抗被标记。这就是直接ELISA和间接ELISA之间的区别。