发布时间:2023-11-10 发布作者:上海通蔚生物
酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种广泛使用的免疫学技术,以其灵敏度高、特异性好、操作简便、适用范围广等特点,在临床诊断、生物研究、食品安全等领域发挥着重要作用。了解ELISA的主要类型及其应用有助于更好地理解和使用这一工具。下面由上海生蔚详细介绍一下。
直接ELISA是最常用的免疫学方法之一,主要原理是将特异性抗体直接吸附到固相载体上,再与相应的抗原反应,通过酶标抗体显色,根据颜色反应结果来判断样本中抗原的含量。直接ELISA主要用于检测抗原,如病毒、细菌和其他微生物等。
间接ELISA主要用于检测抗体,如人类免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒等抗体检测。其原理是将特异性抗原直接吸附到固相载体上,再与相应的抗体反应,通过酶标二抗显色,根据颜色反应结果来判断样本中抗体的含量。间接ELISA也可用于检测其他自身抗体,如类风湿因子、抗核抗体等。
夹心ELISA主要用于检测大分子量蛋白质、多肽等,如肿瘤标志物、细胞因子等。其原理是将特异性抗体与酶标抗体结合,再将特异性抗原直接吸附到固相载体上,最后与相应的抗体反应,通过酶标二抗显色,根据颜色反应结果来判断样本中抗原的含量。夹心ELISA具有较高的灵敏度和特异性,适用于低浓度样本的检测。
竞争性ELISA主要用于检测小分子量物质,如药物、毒素等。其原理是将特异性抗体与酶标抗原竞争性地结合,再将特异性抗原直接吸附到固相载体上,最后与相应的抗体反应,通过酶标二抗显色,根据颜色反应结果来判断样本中抗原的含量。竞争性ELISA具有操作简便、适用范围广等特点,在食品安全、环境监测等领域得到广泛应用。
双抗体夹心ELISA是一种高灵敏度的免疫学方法,主要用于检测细胞表面抗原、可溶性抗原等。其原理是将两种特异性抗体分别与酶标抗体和固相载体结合,再将特异性抗原直接吸附到固相载体上,最后与相应的抗体反应,通过酶标二抗显色,根据颜色反应结果来判断样本中抗原的含量。双抗体夹心ELISA具有较高的灵敏度和特异性,适用于低浓度样本的检测。
六、重组抗原ELISA
重组抗原ELISA是一种基于基因工程技术制备抗原的方法,可以克服传统天然抗原的不足,提高抗原的质量和稳定性。其原理是将目的基因与质粒DNA重组后转化到大肠杆菌或其他微生物中表达,再将其纯化后作为抗原用于ELISA检测。重组抗原ELISA具有更高的特异性和灵敏度,适用于临床诊断和生物研究等领域。