聚合酶链式反应（PCR）的原理及操作步骤

  生物技术发展至今，为如今的科研技术带来了突破，比如我们常见的ELISA、PCR等试剂盒技术。今天，就PCR技术小蔚为各位唠叨一下其原理和步骤。

  PCR又叫聚合酶反应或简称PCR，它提供了一种复制更多DNA部分的方法。PCR这项技术不需要在细胞中发生，实验过程中常用的有PCR试剂盒，可以利于试剂盒进行实验。写到这里，你可能想知道PCR是如何工作的？为什么要复制更多DNA的某些特定部分？接下来鉴定回答一下这两个问题。

  PCR工作原理

  我们想要复制DNA部分，我们需要了解一下PCR实验组成，通常PCR组成包括DNA模版

  引物、DNA聚合酶。由于PCR使用是热量，因此使用的DNA聚合酶通常是耐热型DNA聚合酶。常用到的聚合酶是Taq聚合酶，一种耐热的聚合酶。Taq DNA 聚合酶来源于 Thermus aquaticus，这是一种在 70°C 以上温度下生长的极端嗜热真杆菌。这意味着 Taq DNA 聚合酶在大约 72°C 温度下发挥最佳酶活性。这种热稳定性使Taq聚合酶成为PCR的理想选择。

PCR步骤  

  我们还需要DNA核苷酸来构建DNA聚合酶，我们可以通过三个步骤来了解PCR构成。我们这里将在用一个双链DNA分子进行说明，并假设这是我们需要复制的。

  变性。酶变性使用一种方法是使用热量，此步骤涉及添加分离DNA分子两条链所需的热量。

  退火。现在已经被热量分开的两条DNA链将被量确并被引物链接起来，此步骤温度应允许引物与您想要扩增（既复制）的特定DNA片断结合。

  DNA合成。通过DNA合成，我们将制造更多DNA副本。为此，DNA聚合酶将开始在两条链上工作，并将实验DNA核苷酸作为其构建材料来扩增DNA。需要注意的是，这一步的温度可能比上一步要高一些。适合所用特定DNA聚合酶的理想温度。

  通过上述步骤，完成一个循环后，你就会得到两个双链DNA分子。上述PCR实验步骤有点类似于细胞内DNA复制的情况。你可以重复上述步骤，现在你有两个双链DNA分子，因此，你需要重复变性、退火和DNA合成步骤。你现在有四个双链DNA分子，您再次重复步骤，你现在有八个，依次类推就可以复制多个。

  PCR应用

  PCR使用非常广泛，PCR被用于许多研究实验室，并在法医学，基因检测和诊断方面也有实际应用。例如，PCR用于从患者的DNA中（或在产前检测的情况下从胎儿DNA中）扩增与遗传疾病相关的基因。 PCR还可用于测试患者体内的细菌或DNA病毒：如果存在病原体，则可以从血液或组织样品中扩增其DNA区域。

  关于PCR就介绍这里，上海通蔚也有PCR试剂盒，专为科研实验使用。如果您对PCR及试剂盒感兴趣，也欢迎来电。