ELISA试剂盒加样不准确？这几个技巧帮你解决

  当拿到ELISA试剂盒，在开始做实验之前，正确的加样可以确保实验结果准确性。在ELISA常规实验中，实验涉及加样标准品/样本、加酶结合物、加底物和终止反应等。在进行ELISA试剂盒加样怎样确保实验准确性？

  正确加样步骤

  在加样中，一般使用的是微量加样器（移液器,移液器）。按照试剂盒说明书，将规定量的液体加入酶标板。在每次加入新液体组分前，需要更换新的吸头，以免液体组分发生交叉污染。也可以用一次性的定量塑料管加样。

  部分加样步骤需要需要使用稀释后液体组分，如标准品（冻干粉形式），需要先用一定量的稀释液（通常是试剂盒提供的复溶液或指定的缓冲液）复溶，使其溶解成一定浓度的储备液。然后再将这个储备液按照一定的倍比进行稀释，配制成一系列不同浓度的标准品溶液，用于后续实验的上样（即加到酶标板的孔中）。

  需要将浓缩的抗体和酶结合物用合适的稀释液稀释成1×工作液（即可以直接使用的浓度），才能加到酶标板的孔中。

  加抗体、酶结合物工作液和底物工作液时，可用定量多道加液器，节省加样时间和操作，更好的确保孔与孔之间平行，减少因操作带来的误差。

  在进行ELISA试剂盒加样中，一般需要进行"45"加样。即加样枪的吸头所在的直线应当与板条所在的直线呈45度角，吸头贴着孔壁加入。

  在吸取样品时，枪头不应黏附多余的液体；加样时不可90度向孔中滴加液体，这样会导致液体残留在吸头上，导致加样准确性降低。

  吸头所在的直线与板条所在直线所呈角度不要过小，过小会使残留的液体残留才酶标板孔内，导致加样准确性降低。

  不要将吸头深入孔底，深入孔底可能会压弯吸头，另一方面吸头深入孔底会产生气泡，导致加样准确性降低。

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