深入了解PCR检测试剂盒：组成与原理的解析

  现如今，遗传学帮我我们越来越多的了解周围世界，通过遗传学技术解开进化史，更精确诊断和治疗疾病。为了完成这些工作，我们需要发现并检测DNA序列，然而，我们用来执行操作基本工具之一称为“PCR”或“聚合酶链式反应”。今天，上海通蔚给大家介绍一下PCR检测试剂盒作用原理及组成。

  PCR检测试剂盒组成

  DNA模版。DNA模版，DAN模版可以包含人类血液样品、食物样品、水样品以及棉签上收集的细菌等等。

  引物（primers）。我们要扩增DNA区域，我们需使用称为DNA片段来实现这一点。引物的类型分为正向和反向两种，正向引物将匹配我们想要扩增的区域开头的一条DNA链上的序列，反向序列引物将匹配另一条链上区域的末端。引物在PCR反应起上引导DNA聚合酶合成新的DNA链的作用。

  酶（enzymes）。在PCR检测中最主要的酶是热稳定的DNA聚合酶，DNA聚合酶可以找到引物与DNA模版特异性结合区域的末端，并在适当的条件下催化DNA合成。最常用的是来自热液微生物生物体的热稳定DNA聚合酶，如Taq DNA聚合酶。

  缓冲液（buffer）:PCR检测试剂中的缓冲液用于维持PCR最佳的反应条。它主要作用是控制PH值、离子浓度和稳定酶的活性。

  核苷酸（nucleotides）。核苷酸是PCR试剂中DNA合成的原料。包括脱氧腺苷酸（dATP）、脱氧鸟苷酸（dGTP）、脱氧胞苷酸（dCTP）和脱氧胸苷酸（dTTP）。供给PCR反应中的DNA聚合酶在合成新链时使用。

  PCR检测试剂盒作用原理

  根据PCR技术的工作原理设计，在进行PCR反应时，主要分为三个步骤：

  第一步，变性。模版DNA经过加热至93°左右，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，为下一步退火做准备。

  第二步，退火。模版DNA变性成单链之后，使温度至55度左右，模板DNA单链能够与引物的互补序列配对结合。

  第三步，延伸。DNA模版引物在72度下，DNA聚合酶(如TaqDNA聚合酶)的作用下，以dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸，可构成DNA)为反应原料，靶序列为模板，按照碱基互补配对原则和半保留复制原理，就能合成一条新的与模板DNA链互补的复制链。

  上述为大家总结了PCR检测试剂盒的组成和作用原理，希望上述文章对大家有所帮助。在操作实验过程可以配合说明书及实验过程的注意事项。