聚合酶链式反应(PCR)技术由KaryB.Mullis于1985年发明的。PCR技术诞生，在医疗还是在生命科学上发挥非常大作用。PCR技术发展至今，检测技术逐渐成熟，不同的PCR试剂盒涉及方方面面，例如食品检测过敏原、医学用来快速诊断及生物学可以深入了解生物体如何进化以及生物体如何相互作用等等。如此强大神奇的技术，它有哪些原理呢？接下来跟随本文详细介绍。
PCR试剂盒检测原理
PCR试剂盒的原理是通过模拟DNA复制过程。利用模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶、dNTPs、缓冲液和辅助试剂等组成的试剂体系,在体外扩增目标DNA片段。首先将一段DNA样本连同上面列出的试剂和化学品一起放入合适的试管中。将试管放入PCR仪或热循环仪中。热循环仪对溶液进行3个步骤：变性、退火和延伸。
图1 pcr检测原理
步骤1-变性
使用热循环仪将试管中的溶液加热至至少94°C。高温会破坏原始DNA样本的氢键，并将DNA分离为单链（这称为双链DNA变性）。
步骤2-退火
然后将样品混合物冷却至50至60°C之间，使DNA引物和DNA聚合酶与因加热而分离的单个DNA链结合（这称为引物退火）。此时，添加的混合物溶液中的核苷酸(A、T、C、G)将与加热过程中产生的单个分离的DNA链配对。
步骤3-扩展
一旦结合在一起，它们就会形成一条新的互补DNA链（称为DNA延伸）。因此，原始样本分子的每条单链都形成了一个新的双链DNA分子。温度从95°C循环到50到60°C。然后使用热循环仪重复该循环约35到40次，热循环仪会自动重复该过程的加热和冷却循环。每次循环仪进行加热/冷却循环时，得到的DNA序列都会加倍。因此，最初来自一个样本的单个短DNA片段可以在35个加倍循环后扩增成数百万个副本。
图2 PCR 温度循环
上述步骤提供了由原始样本分子的每个单链形成的新的双链DNA分子副本。这个三步过程进行35到40次，将DNA/RNA扩增成数百万个副本片段。
PCR试剂盒应用
PCR的应用已经非常广泛，下列为大家列出常见的PCR应用：
PCR可以从复杂混合物中扩增单个DNA分子，从而大大避免了使用DNA克隆来制备该分子的需要。该技术的变体可以类似地从复杂混合物中扩增特定的单个RNA分子。
使用PCR大大简化了DNA测序，这种应用现在很常见。
通过使用合适的引物，可以利用PCR来创建目标DNA的点突变，缺失和插入，这极大地促进了基因表达和功能的分析。
PCR灵敏度极高，可以扩增极少量的DNA。因此，使用适当的引物，可以检测出组织中极少量的特定细菌和病毒，这使得PCR在医学诊断中具有无价的价值。
PCR现在对于鉴定医学上重要的DNA样本具有无可估量的价值。例如，在筛查人类遗传疾病方面，它正在迅速取代RFLP的使用。
由于其极高的灵敏度，PCR现在对法医医学至关重要。甚至可以使用PCR扩增人类一根头发或犯罪现场留下的一滴微量血液中的DNA，以便进行详细鉴定。
上海通蔚针对科研开发试剂盒。PRC试剂盒产品有探针法PCR试剂盒、染料法荧光定量RT-PCR试剂盒、RT-PCR试剂盒、探针法荧光定量RT-PCR试剂盒，染料法PCR试剂盒。
图3 通蔚pcr试剂盒
PCR试剂盒选择
选择一款合适的PCR试剂盒检测直接影响实验结果的准确性、可靠性和效率。下面通蔚从几个方面来为大家说明一下：
1、实验目的和目标基因
实验目的是定性PCR还是定量PCR。qPCR用于精确测量目标DNA/RNA的起始量，需要使用含有荧光染料的试剂盒；而定性PCR只需判断目标DNA/RNA的存在与否，使用普通试剂盒即可。关于定性PCR还是定量PCR可以参考《
PCR、RT-PCR和qPCR：哪种技术是你的科研助手？》
目标基因的长度和序列特点：不同的试剂盒对扩增片段长度有不同的适用范围。对于GC含量高或具有复杂二级结构的基因，需要选择具有高保真度和扩增效率的试剂盒。
2、样本类型
样本类型是DNA还是RNA。提取DNA和RNA的试剂盒不同，PCR试剂盒也要对应选择。样本类型是DNA通常会选择PCR常规试剂盒检测即可；如果是RNA，常用于基因表达分析、病毒检测、RNA 病毒的定量等领域。
3、试剂盒性能
灵敏度：指试剂盒能够检测到的最低DNA/RNA浓度，对于低拷贝基因的检测尤为重要。
特异性：指试剂盒只扩增目标DNA/RNA，而不扩增非特异性产物的能力，避免假阳性结果。
扩增效率：指每个PCR循环中DNA/RNA扩增的倍数，高效率的试剂盒可以缩短反应时间，提高实验效率。
4、售后保障
PCR试剂盒虽然操作容易上手，但是在操作过程难免会出现问题，试剂盒售后保障起到非常关键作用。
上述是PCR试剂盒检测原理介绍，了解PCR原理，选择适合自己PCR非常关键。上海通蔚生物科研试剂盒灵敏度、特异性及扩增效率在市场上反馈不错。
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