什么是细胞培养？从基本概念到实践步骤！

  对于实验室搞科研的小伙伴第一次接触细胞培养会紧张又兴奋，害怕自己会出错。今天，上海通蔚生物在这里为大家科普一下细胞培养基础知识，希望可以帮助您在科研之路少走些弯路。

  什么是细胞培养

  细胞培养（cell culture）是指从动物或植物中取出细胞，然后在人工环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等）中培养以进行科学研究。细胞培养也叫细胞克隆技术，在生物学正规的名词叫细胞培养技术。细胞培养技术是直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离，也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。

  培养细胞类别哪些？

  细胞培按类别可分为动物细胞培养、植物细胞培养和微生物细胞培养三类，下面参考表格：

  请注意，这只是对细胞类别培养及其特点的一个简化概述，具体的培养条件和应用领域可能因具体的细胞类型和实验目的而有所不同。

  细胞培养要注意事项

  细胞培养要注意在无菌环境下、合适的温度、适宜的渗透压和气体环境与PH等。

  1、无菌环境。在进行人工环境下首先要注意是无菌五毒，这样可以保证细胞在人工环境下生长繁殖。

  2、合适的温度。环境温度是影响细胞生长的一个重要条件。细胞培养条件一般36.5℃±0.5℃，偏离这一温度范围，细胞正常代谢会收到影响，甚至死亡。

  3、合适的渗透压。渗透压，本质是溶液中溶质微粒对水的吸引。高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。在人工环境培养细胞理想的渗透压为260～320mmol/L，一般来说适合大多数细胞。

  4、气体环境和PH值。当细胞内部的PH值偏离正常范围时，它会导致构象酶发生变化，从而会影响细胞内部的酶活性，严重影响细胞的代谢和生长发育。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。

  细胞培养步骤

  细胞培养步骤分为细胞复苏、细胞传代和细胞冻存

  复苏

  复苏是从低温保存状态中将细胞唤醒并重新引入正常生长环境的过程。这通常涉及从液氮或-80℃冰箱中取出细胞冻存管，迅速将其放入37℃水浴中融化，然后转移细胞至含有适当培养基的培养皿或培养瓶中。复苏过程中需要确保细胞快速而均匀地受热，以减少冰晶对细胞的潜在伤害。复苏后的细胞需要被放置在培养箱中，在适当的温度和湿度条件下培养，以便它们能够重新适应并恢复生长。

  传代

  传代是当细胞在培养中增殖到一定密度时，将其分离并转移到新的培养基中以继续生长的过程。这通常涉及使用胰蛋白酶或其他消化酶将细胞从培养皿或培养瓶底部分离下来，然后将其重新悬浮在培养基中，并分配到新的培养容器中。传代的目的是防止细胞因过度增殖而接触抑制，从而保持细胞的活力和增殖能力。传代过程中需要仔细操作，以避免对细胞造成过度机械应力或污染。

  冻存

  冻存是将细胞保存于低温环境中，以便长期保存和后续使用的过程。这通常涉及使用含有细胞冻存液（如DMSO）的培养基，将细胞逐渐降温至-80℃或更低，然后将其转移到液氮中长期保存。冻存过程中需要严格控制降温速率，以减少细胞内冰晶的形成，从而保护细胞的完整性和活性。冻存的细胞可以在需要时复苏并重新引入培养，以进行后续实验。

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