ELISA的主要常用类型及步骤
发布时间:2023-05-08 发布作者:通蔚
ELISA的主要常用类型及步骤
1. 间接法测抗体
间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:
1》将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2》加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。
3》加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
4》加底物显色。