发布时间:2024-08-19 发布作者:上海通蔚生物
细胞培养基是由无机盐、碳水化合物、维生素、氨基酸、代谢前体、生长因子、激素和微量元素等组成的复杂混合物。不同细胞系对培养基中成分的要求不同,对特定成分的浓度和种类都有不同需求,从而衍生出各种类型的培养基。相关阅读《科研必读:了解细胞培养基的六大主要成分》
常见的细胞培养基有DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。除此之外,其它如:M199 、IMDM 、L15培养基等也用于某些细胞的培养。
MEM 培养基(Minimum Essential Medium)是细胞培养中常用的基础培养基之一,它最初由美国纽约州立大学的Harry Eagle于1958年研发,并以其 “最小必需培养基” 的命名方式体现了其对于细胞生长的重要性。
MEM 培养基仅含有12种必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8种维生素,含糖量为1g/L。MEM是一种最基础、最常用的细胞培养基,主要应用于贴壁细胞的培养,在添加血清后,可用于培养多种单层生长的细胞,如成纤维细胞。配方修改后的的a-MEM则能广泛应用于各种哺乳动物悬浮和贴壁细胞培养。
DMEM 培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 是一种广泛应用于细胞培养的培养基,是目前使用最广泛的培养基之一。它最初由 Renato Dulbecco 于 1959 年在加州理工学院研发,并以其名字命名。
氨基酸含量是MEM的两倍,维生素含量是MEM的4倍,以及硝酸铁、丙酮酸钠和一些补充氨基酸。DMEM分为低糖型和高糖型,葡萄糖含量分别为1g/L和4.5g/L。低糖适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养;高糖更适合高密度悬浮细胞培养。
RPMI 1640 培养基 (Roswell Park Memorial Institute 1640 Medium) 是一种广泛应用于细胞培养的培养基,尤其适合于免疫细胞,例如淋巴细胞、白血病细胞和骨髓瘤细胞等的培养。它是由美国罗斯威尔帕克纪念研究所 (Roswell Park Memorial Institute) 于 1960 年代研发,并以其名称和编号命名。
现也用于悬浮细胞培养,如哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
DMEM/F12 培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12) 是一种混合培养基,它结合了 DMEM 和 F-12 培养基的优点,为多种细胞系,特别是对营养需求较高的细胞系,提供了更完整的营养支持。在此培养基中成功培养的细胞包括:MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞和人内皮细胞等。
M199 培养基 (Medium 199) 是细胞培养领域中一种经典的基础培养基,最初由美国国立卫生研究院 (NIH) 的 Morgan 等人于 1950 年代研发,并以其编号命名。
M199除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。现广泛用于病毒学、疫苗生产。
IMDM 培养基 (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) 是一种专门为免疫细胞培养而设计的培养基,它是由加拿大渥太华大学的 Iscove 等人研发,并以其名字命名。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM还能够促进小鼠B淋巴细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。
L15培养基是一种无血清培养基,专为在空气中或低氧环境下培养哺乳动物细胞而设计。L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养,用于在CO2缺乏的情况下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系,氨基酸组成进一步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。
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