培养基为细胞在体外培养提供生长和繁殖所需要营养物质和环境条件,是生命科学研究中不可或缺工具。培养基按分类分为基础培养基、完全培养基和无血清培养基等,不同培养基对细胞培养作用有截然不同。
本文将重点介绍基础培养基。例如,DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是最常用的基础培养基之一,适合大多数哺乳动物细胞的生长。深入了解基础培养基,能够帮助科研人员在细胞培养过程中选择合适的培养基进行实验,从而少走弯路,取得更准确的实验结果。
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基础培养基的种类
基础培养基种类繁多,常见的种类包括DMEM、RPMI1640、MEM和199培养基,它们分别用于不同细胞类型和实验目的。了解不同基础培养基特点,可以帮助您选择合适培养基,为细胞培养实验中奠定基础。如果您正在选购基础培养基,上海通蔚提供多种优质的基础培养基,满足您的不同需求。
DMEM基础培养基
DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是意大利裔美国病毒学家雷纳托·杜尔贝科(RenatoDulbecco)改良的Eagle。与原始的Eagle最低必需培养基相比,Dulbecco改良的Eagle培养基包含更高的氨基酸和维生素浓度,是其四倍。
最初的DMEM培养基配方包含较低浓度(1g/L)的葡萄糖和丙酮酸钠。目前,DMEM培养基有多种配方可供选择,包括高葡萄糖浓度配方和低葡萄糖浓度配方,以及含有丙酮酸钠或不含丙酮酸钠的配方。DMEM培养基采用碳酸氢钠缓冲系统,在5-10%的CO2环境中能够维持细胞所需的生理pH值。为了满足细胞的生长需求,DMEM培养基通常需要添加胎牛血清(FBS)等添加剂。
Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)是一种广泛使用的基础培养基,可用于支持多种不同的哺乳动物细胞生长。已经在DMEM中成功培养出的细胞包括原代成纤维细胞、神经元、胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等细胞系。
RPMI1640基础培养基
RPMI1640培养基是以其开发地点罗斯威尔公园纪念研究所命名的,它是对McCoy5A基因的改良版本,并含有更高浓度的肌醇。RPMI1640培养基的独特之处在于它含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。与Eagle’sMEM和DMEM不同,RPMI1640培养基包含生物素、维生素B12和PABA。此外,RPMI1640培养基还含有高浓度的肌醇和胆碱。由于RPMI1640培养基不含蛋白质、脂质或生长因子,因此通常需要添加10%胎牛血清(FBS)等添加剂来满足细胞的生长需求。RPMI1640培养基采用碳酸氢钠缓冲系统,在5–10%CO2环境下可以维持细胞所需的生理pH值。
RPMI1640培养基最初是为悬浮培养人白血病细胞而开发的,但它被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和癌细胞。RPMI1640培养基在悬浮培养方面表现出色,并且可以支持多种细胞的生长,因此在细胞培养研究中被广泛应用。为了满足不同的细胞培养需求,RPMI1640培养基有多种改良配方可供选择,您可以使用培养基选择工具查找适合您的配方。
MEM基础培养基
MEM(MinimumEssentialMedium,最低必需培养基)最初由科学家HarryEagle基于他之前设计的Eagle基本培养基(BEM)进行改良和优化而来,它将BEM中的成分简化为更基本的必需营养物质。MEM培养基被称为"最低必需",因为它只包含维持细胞基本生长所需的必需营养物质,使细胞能够在体外环境下存活和繁殖。与BME相比,MEM培养基含有更高的氨基酸浓度。MEM培养基可以使用厄尔盐或汉克斯盐配制,分别用于维持CO2培养箱或大气环境下的pH值。由于MEM培养基不含蛋白质、脂质或生长因子,因此通常需要添加胎牛血清(FBS)等添加剂来满足细胞的生长需求。
MEM可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞的培养,包括HeLa、BHK-21、293、HEP-2、HT-1080、MCF-7、成纤维细胞和原代大鼠星形胶质细胞等。MEM培养基能够有效支持多种细胞的生长,并且具有较高的性价比,因此在细胞培养研究中被广泛应用。
M199基础培养基
Medium199基础培养基,通常简称为M199,是由J.F.Morgan于1950年开发的一种细胞培养基。最初,M199是为了研究鸡胚成纤维细胞的营养需求而开发的。M199具有广泛的物种适用性,特别适用于培养非转化细胞。M199广泛用于病毒学、疫苗生产以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶状体组织的原代外植体的体外培养。
与其他基础培养基相比,M199含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶和多种维生素。M199含有Earle盐,适用于CO2培养箱。M199不含蛋白质、脂质或生长因子。M199使用碳酸氢钠缓冲系统(2.2g/L),因此需要在5-10%CO2环境下才能维持细胞所需的生理pH值。
M199培养基在培养非转化细胞方面表现出色,并且可以支持多种细胞的生长,因此在细胞培养研究中被广泛应用。
如何选购基础培养基
选择基础培养基时,需要综合考虑细胞类型、实验目的和成本效益。
对于购买的新细胞株,可以咨询出售单位,了解其推荐的培养基信息。
对于特定实验所需的细胞,可以查阅相关文献,参考他人的经验,根据细胞株的特点和实验需求选择合适的培养基。
如果缺乏相关文献支持,可以尝试使用多种培养基培养目标细胞,观察其生长状态,进行生长曲线或集落形成等指标分析,根据结果选择合适的培养基。
对于重要的实验,在选择细胞培养基上,可以选择一些口碑较好的公司所产的培养基,或者是目标细胞出售单位配套的培养基,一般这样可以避免由于培养基质量问题带来的实验误差,给实验的顺利进行奠定基础。
建议在选择基础培养基时,可以参考以下建议:
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了解常用基础培养基的特点和适用范围,例如DMEM、RPMI1640、MEM等。
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注意培养基的批次差异,建议使用同一批次培养基进行实验。
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确保培养基的灭菌质量,建议使用专业的灭菌设备和方法。
上述为大家介绍了常见基础培养基,相信你对基础培养基有所了解。如果您对基础培养基还有疑问或者选购,欢迎前来咨询。