降低细胞培养污染率，就这么简单！

  当你每天在实验室辛辛苦苦培养细胞，眼看着培养皿中细胞一天天茁壮成长，实验即将进行的细胞活性分析。遗憾是一场突如其来的细菌污染却让一切功亏一篑，不得不重新开始实验。由此可见，在细胞培养过程中，预防污染的重要性不容忽视。

  污染起源

  污染通常是由于微生物或支原体的存在造成的。至于细菌，文献研究表明污染程度可达5%。这种污染很难检测：视觉特征突然改变，发育中期出现浑浊或颜色改变。至于支原体，用肉眼检测是不可能的。它们是最小的独立生物体，但却是大量污染的根源。

  细胞培养污染物可以分为化学污染和微生物污染。化学污染来源于非生命物质，例如培养基成分、水中的杂质或储存过程中产生的降解产物。这些污染物会干扰细胞的正常生长和代谢。例如，革兰氏阴性细菌细胞壁中的脂多糖（LPS），又称为内毒素，是一种常见的化学污染物，即使在细菌死亡后仍然具有生物活性，能引起细胞培养物发热反应。内毒素属于热原，热原是能引起发热的物质，包括LPS以及其他微生物产生的外毒素、病毒、真菌等。

  为了防止细胞培养污染，需要严格执行预防措施，包括但不限于：对设备进行彻底清洁和消毒；在生物安全柜等无菌环境中进行操作；使用无菌水和高质量的培养基；定期监测培养箱和水浴的温度和清洁度；操作人员的规范操作和良好的无菌技术等等。

  细胞污染有什么影响

  细胞污染会对实验研究产生一系列严重的影响：

  1.实验结果失真：污染物会干扰细胞的正常生长和代谢，导致实验数据失真，例如细菌代谢产物可能影响细胞活性，支原体污染可能导致假阳性结果，从而误导研究结论。

  2.时间成本增加：污染不仅会浪费宝贵的实验时间，还需要额外的时间进行污染鉴定、清除污染、恢复实验，甚至可能需要从头开始整个实验。

  3.经济损失：污染会导致细胞培养基、血清、培养瓶、移液器吸头等试剂和耗材的损失，甚至可能损失珍贵的实验动物或细胞株，造成经济损失。此外，清洁、消毒和重复实验也会增加人工成本。

  4.团队合作和实验室声誉：人为错误是细胞污染的重要原因之一，例如操作不规范、缺乏经验或沟通不畅。反复发生的污染事件会影响团队的士气，损害实验室的声誉，甚至可能影响研究项目的进展。”

  如何防止细胞培养污染

  至于支原体，有不同的测试可以在培养中检测它们：特定培养测试、DNA比色测试或PCR检测测试。

  然而，最好的策略是预防、早期发现和消除所有受感染或潜在受感染的物质。

  为了降低微生物污染风险，处理在无菌环境中进行。

  改进工艺以降低农作物污染风险的方法包括：

  1.减少所准备的培养基数量，以避免其因受热或亮度而发生降解……

  2.使用合适的产品对孵化器和其他仪器进行消毒

  3.使用质量水平与细胞培养兼容的设备：不含DNA、不含RNase、不含DNase、不含内毒素……–

  4.确保环境清洁（灰尘、蜘蛛也会造成污染）

  5.避免存放纸板箱，因为只要有一点湿度，霉菌就会非常喜欢纸板箱

  综合上述，细胞培养要有预防意识，细胞培养要确保处于无菌环境，设备及时进行消毒、保持实验室环境清洁，避免乱堆放纸板箱等。积极做好细胞培养预防工作，可以极大提高细胞培养工作效率，获得良好的细胞培养成果。