对于刚接触这方面科研类的人群对
ELISA检测比较陌生,那么,
ELISA检测方法有哪些?今天由通蔚生物为大家详细介绍一下。
ELISA又叫酶联免疫吸附测定法(英文简称,ELISA)的简称。它是在免疫酶技术基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。
认识免疫酶技术?
免疫酶技术是一种免疫检测技术,它结合了抗原抗体反应的特异性和酶有效催化反应的专一性。该技术将酶与抗体或抗原结合成酶标记抗体或抗原,此结合物既保留了抗体或抗原的免疫学活性,同时又保留了酶对底物的催化活性。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。
ELISA检测方法4种方法
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直接法(Direct ELISA):将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量。此一级抗体的特异性非常重要。
优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
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间接法(Indirect ELISA):此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它多的免疫反应性。缺点:交互反应发生的几率较高。
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双抗体夹心法(Sandwich ELISA):被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。
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竞争法(Competitive ELISA):此方法整体敏感性和专一性都较差。
检测过程注意事项:
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操作要规范,以减少交叉污染和误差。
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确保所有试剂和设备均处于良好状态。
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标准曲线的构建和测定要精确,以保证待测样品的浓度准确。
上文由通蔚生物为大家介绍了ELISA及检测方法,希望对您在ELISA检测过程有所帮助。如果对上文还有疑问不懂可以和通蔚在线客服沟通,我们会帮您解答。