【通蔚生物】：分享怎么用流式解决细胞周期检测

细胞周期是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程，可反映细胞增殖的速度。
细胞周期由多个阶段组成，通常包括G1期(细胞大小增加)、S期(DNA合成和复制)、G2期(细胞进一步生长)，以及M期(有丝分裂和细胞分裂)、GO期(细胞静息休眠)。在细胞周期的不同时期，细胞核内的DNA含量存在差异。使用染料对DNA进行染色(如PI染料)，可根据其荧光强度判断细胞所处时期——DNA含量多，荧光强度高，DNA含量少，荧光强度低。检测过程中，常遇见可以当天检测的活细胞样本，以及当天无法检测的活细胞样本，通蔚自主研发的细胞周期检测产品就派上大用处了，既能检测活细胞又能检测固定细胞。

活细胞/固定细胞周期检测检测步骤已为大家整理好，如下：
流式细胞周期检测中有许多需要注意的事项，来看制备单细胞悬液，操作应轻柔，减少碎片，但消化要充分而不过度，保证细胞不粘连、不破裂，染色要充分；最低速度上机检测，降低CV，避免仪器把相邻细胞当做一个细胞；排除粘连体，避免细胞粘黏检测的DNA含量为非2倍体，导致实验结果不准确PI的坐标选线性，线性更能体现DNA含量的倍数关系；利用RNase消除细胞周期检测中RNA的影响，PI是一种插入性核酸荧光染料，能选择性地嵌入核酸DNA双链螺旋的碱基之间并发出荧光，但也可以插RNA的双链区，非 DNA特异性，需加入RNase消除RNA的影响；进行DNA染色时不要洗涤，不同于蛋白质染料和细胞之间的牢固结合，DNA与染料的结合，是一种结合态与游离态之间松散的平衡，洗涤步骤会造成染料丢失，降低核酸的特异性荧光，造成测量值降低；实验放最后做，由于PI具有黏性，通常周期实验放在最后做，否则需要深度清洗后，再进行其它实验。