酶联免疫吸附实验：ELISA 样本处理

样品的存储：

1.避免污染：遵循制造商的指导来存储样品。

2.标签和密封： 确保样品正确标记和密封，以防止干燥或蒸发。

3.及时分析：尽快分析样本以获得准确的结果。

样品采集：

1.遵守规则： 遵守样本采集的法律准则。

2.告知客户： 让客户知道需要多少样品。

3.反映状况：确保结果准确反映收到的样本的状况。

样品制备：

1.遵循说明：遵循测试套件的说明来混合和提取分析物。

2.使用适当的设备： 确保所有设备合适且维护良好。

3.时间：分析前准备样品或按指示储存。

使用冷冻样品：

1.解冻： 根据分析物的稳定性，在 4°C 或室温下完全解冻样品。

2.混合：彻底混合液体样品，不要产生泡沫。

3.避免反复冷冻： 将样品分装于-20°C 下保存，以避免多次冻融循环并保持样品质量。

细胞培养上清液：

1.离心： 在 4°C 下以 1,500 rpm 的速度旋转培养基 10 分钟。

2.储存： 分装并将上清液储存于 -80°C。避免反复冻融。

细胞提取物：

1.准备：将组织培养板放在冰上，并用冰冷的 PBS 清洗细胞。

2.提取：每 100 毫米平板添加 0.5 毫升提取缓冲液，刮下细胞，收集在冷却的试管中，短暂涡旋，并在冰上孵育 15-30 分钟。

3.离心： 4°C 下以 13,000 rpm 旋转 10 分钟。

4.储存：分装上清液并储存于 -80°C。避免反复冻融。

条件培养基：

1.培养细胞：使用含血清的培养基直至细胞达到所需的汇合度。

2.准备培养基： 用温热的 PBS 清洗，添加无血清培养基，孵育 1-2 天。

3.离心： 在 4°C 下以 1,500 rpm 的速度旋转培养基 10 分钟。

4.储存：分装并将上清液储存于 -80°C。避免反复冻融。

牛奶、尿液、唾液：

1.离心： 4°C 下以 10,000 xg 旋转 2 分钟。

2.储存：分装上清液并储存于 -80°C。避免反复冻融。

等离子体：

1.收集血液： 使用抗凝管，在 4°C 下以 3,000 rpm 离心 10 分钟。

2.储存：分装上清液（血浆）并储存在 -80°C 下。避免反复冻融。

血清：

1.收集血液：使用未经处理的试管，在室温下孵育 20 分钟。

2.离心： 4°C 下以 3,000 rpm 旋转 10 分钟。

3.储存：分装上清液（血清）并储存在 -80°C 下。避免反复冻融。

组织提取物：

1.解剖组织： 在冰上操作，在液氮中快速冷冻。

2.提取： 每~5 mg 组织添加~300 µL 提取缓冲液，均质化，然后冲洗刀片。

3.搅拌：在 4°C 下混合 2 小时，然后在 4°C 下以 13,000 rpm 离心 20 分钟。

4.储存：分装上清液并储存于 -80°C。避免反复冻融。

一般建议：

1.蛋白质浓度： 目标浓度为≥1-2 mg/mL。

2.稀释： 用结合缓冲液将血清、血浆、细胞和组织提取物稀释 50%。

3.离心解冻样品：使用前在 4°C 下以 10,000 rpm 旋转 5 分钟。

存储期限限制:

2-8°C：适合最多5天。

-20°C：适合长达6个月。

-80°C：可保存长达 2 年

液氮：适合通过适当的方法无限期保存。

避免反复冻融循环:

1.将样品分成更小的等份以减少多次冻融循环的需要。

2.在15-25°C水浴中快速解冻样品并立即使用。

3.如果要重新冷冻，请在解冻后立即进行，以尽量减少样品的降解。

套件的存储:

1.储存于 2-8°C 干燥处；避免冷冻组件。

2.遵守标签上的有效期。

3.防止试剂盒冻结以避免损坏和无效结果。

先进先出:

1.优先使用有效期最短的套件。

2.请注意工具盒上的首次使用日期，以防止混淆。

预热：

1.使用前将所有试剂恢复至室温（20-25°C）。

2.使用后应立即将组件放回储存条件。

未使用组件的存储：

1.将未使用的微量滴定板存放在装有干燥剂的可重新密封的袋中。

2.将所有组件直立并安全关闭地存放。