发布时间:2024-10-28 发布作者:上海通蔚生物
在ELISA实验中,我们会用到各式各样的化学试剂,如果这些化学试剂存储不当最终会影响实验效果。那么化学试剂应该如何存储呢?接下来由通蔚生物为您详细介绍下。
之前在《酶联免疫试剂盒有什么?》一文介绍一个完整的ELISA试剂盒包括酶标板、抗原抗体、酶标记抗体、包被液、封闭液、洗涤液、终止液和底物等。下面为大家详细介绍各个试剂保存条件:
1.酶标板。我们常用的酶标板材质是聚苯乙烯或聚氯乙烯。
酶标板保存原则:避免防潮、防污染和温度控制,以确保酶标板的活性及准确性。
2.抗原和抗体:抗原保存方式取决于抗原的类型和纯度,以及实验的需求。
天然抗原要避光保存,保存时最好使用棕色瓶或避光储存,避免活性受到影响;重组抗原可能对冻融循环更为敏感,因此建议将抗原分装成小份量保存,避免每次取用时反复解冻。
温度:短期保存一般建议在4℃条件下短期保存数天,如果须长期保存一般建议在-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。如果抗原是溶液状态,可加入保护剂(如甘油)防止结冰。
3. 酶标记抗体:常见的标记酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)。酶标记抗体首先要避光保存,防止光敏感。其次,在保存上,短期保存在4℃冰箱中。如要长期保存,建议将抗体分装后置于-20℃或-80℃冰箱中,以避免反复冻融。
4. 包被液:通常为pH 9.6的碳酸盐缓冲液。包被液应密封保存,以防挥发和外界环境因素的影响,如暴露在空气中可能会与二氧化碳反应,从而改变pH值。除此之外,要避光保存,使用棕色试剂瓶或避光容器。
5. 封闭液:1%~5%牛血清白蛋白(BSA)溶液。封闭液要进行密封保存,避免成分(如蛋白质、缓冲液等)在暴露空气中易发生变化,密封能有效延长其稳定性。其次,封闭液种蛋白质成分在反复冻融可能会沉淀或失活,因此建议分装成小份,每次使用时取用一份,以防止冻融过程对封闭液质量的影响。
6. 洗涤液:通常为磷酸盐缓冲液(PBS)。洗涤液通常要进行密封保存,防止蒸发和外界杂质进入,确保每次使用的洗涤液浓度和成分不发生变化。其次,洗涤液要避免污染,因此建议在使用时采取无菌操作,尽量使用无菌容器和移液工具。
7. 底物:通常常见的底物,如TMB、ABTS等显色剂。底物溶液容易光过敏,光照会导致氧化、降解,因此最好将其存放在棕色瓶中或避光容器中,以延长其有效期。除此之外,还要进行密封保存,防止空气中的氧气和杂质进入溶液中,导致氧化或变质。特别是TMB溶液,对空气非常敏感,打开后应尽量减少暴露时间。
8. 终止液:通常包含某些化学成分(如硫酸、氢氧化钠等)。终止液在保存时应密封,以防止挥发和污染。确保瓶盖紧闭,避免水分和空气的进入。注意,某些终止液可能在配制后会逐渐失去活性,因此最好在短时间内使用新鲜配制的终止液。
上述为大家介绍了ELISA试剂盒及化学试剂保存的条件,希望上述内容对您日后存储ELISA试剂存储有所帮助。在进行ELISA实验时,应严格按照说明书进行实验,提高实验的准确性。