【通蔚生物】：猪圆环病毒3型染料法荧光定量PCR试剂盒原理介绍

猪圆环病毒3型探针法荧光定量PCR试剂盒规格实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:

1.TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时，Taq酶的5'- 3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变(SNP)，有望成为基因诊断和个体化用药分析的*技术平台。

2.SYBR荧光染料:在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地参入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定PCR反应是否特异。

3.分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近，不会产生荧光。PCR产物生成后，退火过程中，分子信标中间部分与特定DNA序列配对，荧光基因与淬灭基因分离产生荧光。

荧光定量PCR服务:

简介:实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems推出，该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前该技术已被广泛用于检测细胞mRNA表达量的变化;比较不同组织的mRNA表达差异;验证基因芯片，siRNA干扰的实验结果等。我公司为您提供全套实时荧光定量PCR试剂盒技术服务，全部实验皆使用PCR试剂完成，主要定量PCR仪器。

1、荧光定量PCR服务要求:

(01）请您提供新鲜的且尽量多的材料;或直接提供纯化好的总RNA (大于5ug/样品);或直接提供纯化好的DNA(大于5ug/样品)。
(02）请提供已知的全长基因序列。

(03）请提供尽可能详细的背景资料:DNA/RNA来源等

2、荧光定量PCR操作程序

(o1）引物(探针)设计与合成。
(03）进行Real Time PCR实验，进行实验结果分析。

(04）实验完成后，提供完整的实验报告（含软件分析结果）及引物等实验材料。

上海通蔚生物科技有限公司自成立以来，一向以“优异的产品，优惠的报价和交心的服务”得到广阔新老客户的必定和支撑，不断提高自身的专业技术水平和服务质量，为您提供非常好的产品。