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PCR 和 qPCR 有什么区别?qPCR:实时定量 PCR 技术

发布时间:2024-04-16     发布作者:通蔚生物

  PCRqPCR有什么区别?PCR可以实现DNA片断扩增,而qPCR具有实时定量扩增的 DNA 片段,这就意味着qPCR 不仅可以告诉你某个 DNA 片段是否存在,还可以告诉你它的数量有多少。如果您还不了解,没关系,接下来上海通蔚将这些分子生物学概念更加巨像化,便于您的理解。


  什么是PCR


  PCR(聚合酶链式反应)是一种实验室技术,由KaryMullis20世纪80年代开发,如今用于从少量DNA产生大量DNA


  PCR通常是其他过程中使用的步骤,例如DNA测序、病原体检测和凝胶电泳。PCR是一种重要的诊断技术,常用于病毒学、微生物学、寄生虫学、真菌学和牙科等领域。


  聚合酶链式反应(PCR)是一种用于制备DNA特定片段的多个副本的方法。这个过程从少量模板DNA开始,然后通过称为聚合酶的酶进行复制。通过重复加热和冷却循环可以增加复制的数量,这会分离DNA链,以便它们可以再次复制。


  PCR的最终产物是目标DNA序列的大量相同副本。然后该产品可用于进一步分析,例如测序或Southern印迹。PCR还可用于从mRNA模板分子制备cDNA


  什么是qPCR


  定量聚合酶链式反应(qPCR或定量PCR)与PCR非常相似,但它还允许您量化样品中存在的目标DNA的量。qPCR涉及在扩增过程中添加与目标DNA结合的荧光染料或探针。当这些探针被激光激发时,它们会发出不同波长的光。


  通过测量每个波长发出的光,您可以确定在扩增开始之前样品中存在多少目标DNAqPCR还可用于通过测量荧光随时间的增加来实时监测扩增进度。

PCR

  PCRqPCR之间的差异


  PCRqPCR之间的主要区别在于qPCR实时方法,而PCR不是。这意味着通过qPCR,您可以实时监控目标DNA的扩增情况。


  两种方法之间的另一个区别是qPCR需要使用荧光染料或探针,而PCR则不需要。这些探针可让您定量样品中存在的目标DNA的量。


  PCR通常用于扩增DNA以进行测序或其他下游应用。


  qPCR通常用于检测和定量RNA病毒。


  PCRqPCR的应用和用途


  聚合酶链式反应


  PCR是一个相对简单的过程,可以检测DNA是否存在。PCR应用于许多不同的领域,包括法医学、医学和生物技术。它经常用于扩增小片段DNA以进行测序或其他下游应用。


  PCR还可用于从mRNA模板分子制备cDNA


  定量PCR


  qPCR提供测量反应速率的实时数据,提供有关任何给定时间样本中存在的DNA数量的信息,本质上,它能够测量基因表达速率。


  在分子生物学中,这有助于理解蛋白质合成,从而有助于理解健康和疾病的生物途径。实时或qPCR可用于检测基因表达、病原体和RNA的存在和数量,以及验证DNA微阵列结果和环境应用。


  qPCR具有高通量和更宽的动态范围的优点,因为它可以在同一孔内检测广泛的表达水平。由于其多重功能,可以在同一实验中扩增多个目标、高通量和快速结果,因此运行起来更加经济。


  用于PCRqPCR的设备


  有许多不同类型的设备可用于PCRqPCR。最常见的设备类型是热循环仪,它用于加热和冷却样品以使DNA扩增发生。


  其他常见类型的设备包括逆转录酶、荧光染料或探针以及激光器。根据您的具体应用,您可能还需要其他类型的设备。


  PCRqPCR是许多不同领域中使用的重要方法。通过了解它们之间的主要区别,您可以为您的特定应用选择合适的方法。


  PCRqPCR区别通蔚给大家介绍到这里。其实PCRqPCR区别就在于qPCR 通过使用荧光染料或探针来实现实时监测和定量。简单来说,qPCR PCR 的基础上增加了一个计数器,可以更精确地测量 DNA 扩增的数量。其实它们之间扩增原理和实验流程差别不大。也希望您通过学习和了解,在今后的PCR实验中增加更多乐趣和成果。