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胎牛血清是干什么的?通蔚生物来告诉您!

发布时间:2024-03-21     发布作者:上海通蔚生物

  什么是胎牛血清?(Fetal Bovine Serum, FBS)是一种取自牛胚胎的血清,常用于配置动物细胞的培养基,是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。在细胞培养实验,它能提供必要的生长激素、脂质和其他养分以供细胞生长。胎牛血清来自母牛在怀孕5-8月胎牛,采用心脏穿刺采血,取得的血液通过离心等方法,经加工后就成了胎牛血清。

  

  胎牛血清生产工艺

  

  一个合格的胎牛血清往往来自良好的生产工艺。那么,胎牛血清生产工艺流程有哪些呢?

胎牛血清供应链

图1(胎牛血清生产流程)

  

  胎牛血清主要步骤如下:

  

  胎牛血清的收集。采集的胎牛血清是在经过政府批准设施中采集,在兽医监督下对健康的母牛进行临床检查,然后用最严格的无菌采集技术。在采集过程,通过心脏穿刺从封闭系统中的过期胎儿中抽取血液,取得的血液通过离心等方法,经加工后就成了胎牛血清。

  

  冷冻离心。采集的血液无菌包装保存,冷藏,促进凝固,获得高纯度血清。然后可以通过在冰箱中离心分离透明的黄色血清。这会从凝固的血液中去除细胞成分和凝血因子。

  

  过滤除菌。血清通过过滤链过滤用于细胞培养(通常为0.1μm三重过滤)。消除潜在细菌污染的类似过程是必要的,但不能完全消除病毒。如果需要,可以通过辐射(伽马射线)进一步对血清进行灭菌。

  

  分装贴标保存。接下来进行无菌包装和贴标,并将样品冷冻直至实验室使用。该过程减少了有助于细胞生长的生物活性成分的降解,并可能显着影响胎牛血清的最终质量。

  

  胎牛血清的主要成分

  

  血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,可用于各种常规的细胞培养。胎牛血清的主要成分是血清白蛋白,除此之外,胎牛血清含有细胞生长因子,胎牛血清也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及激素类物质。

  胎牛血清

图2(胎牛血清)

  胎牛血清主要功能

  

  FBS成分与细胞生长、增殖、成熟和分化之间的相互作用仍在研究中。在贴壁细胞中,例如用于培养肉生产的牛肌肉来源的卫星细胞,细胞与培养皿的安全附着是早期细胞生长的重要因素。

  

  影响细胞粘附的FBS因子包括血清扩散因子,包括纤连蛋白和层粘连蛋白。白蛋白是血清中存在的非粘附蛋白之一,可激活粘附和扩散因子,并影响细胞粘附的程度,并且取决于非粘附蛋白的量。

  

  此外,胎牛血清在牲畜生长过程中产生的免疫球蛋白含量极低,生长因子含量高;因此,它可用于各种物种的细胞培养,因为抗体引起的免疫反应被最小化。尽管其影响因生长的细胞类型而异,但血清中存在的生长因子在细胞生长和增殖中发挥着重要作用。此外,虽然在不添加单独的生长因子的情况下将生长因子单独添加到血清中的效果是明显的,但是根据生长因子的类型和含量,效果可能不均匀。有效诱导细胞生长的胎牛血清因子包括生长因子和细胞因子。这些因素有时会影响分化,例如表皮生长因子、胰岛素样生长因子(IGF)和血小板源性生长因子。这种效应可以缩短细胞培养周期,降低亲代生产或实验分析的成本。

  

  血清中酶和激素的组成根据动物的屠宰期而变化。这些血清混合物成分含有细胞增殖和维持所需的大部分因子;因此,建议根据细胞培养的目的适量使用。尚未成功地对每种成分的效果进行明确的研究。与成年动物全血的成分类似,血清中的多种营养素可以促进细胞生长。糖类或氨基酸可以支持细胞增殖和代谢所需的能量。胎牛血清中含有微量的维生素和矿物质,甚至这些量也会影响细胞的生长。已经进行了许多研究来确定维生素或矿物质对各种类型细胞的粘附、增殖或分化的积极/消极影响。

  

  此外,激素因子和转运蛋白(携带激素、矿物质、微量元素和脂质)是维持细胞培养过程中pH变化的必要成分,它们也会影响蛋白酶抑制。这些效应对于维持细胞活力非常重要。

  

  胎牛血清使用要点

  

  合理正确的使用胎牛血清可以使胎牛血清在细胞培养中发挥理想效果。在使用胎牛血清一些要点要留意,主要是存储和解冻。

  

  胎牛血清的存储。胎牛血清需在-20度长期避光保存,因为低温可以有效地延缓血清中生物活性物质的降解和变性。注意:如果在4度保存,不应超过一个月。在使用血清时候,避免反复冻融,注意分装使用。

  

  正确解冻。胎牛血清解冻非常关键,可先在4度冰箱过夜解冻,这里推荐使用血清融化三步法:即将500ml血清在室温下放置1.5h20℃水浴25min37℃ 水浴35min

  

  好了,上述上海通蔚为大家介绍胎牛血清,从生产工艺到胎牛血清的成分及存储。市面上出现各类的牛血清,比如胎牛、新生牛和小牛,其实三者区别不大,主要区分是根据年龄不同来命名。胎牛血清因胎牛在母体内未接触外界,免疫球蛋白含量应该是极少的,血清比较纯,培养细胞的效果较佳,其次是新生牛和小牛。具体根据自身的实验要求进行选择。