测定规格:24样
有 效 期:6个月
测定方法:分光光度法
保存条件:低温避光保存
磷酸转乙酰酶(PTA,EC 2.3.1.8)是与乙酸代谢相关的关键酶之一。磷酸转乙酰酶(PTA)催化辅酶 A 和乙酰磷酸反应生成乙酰辅酶 A 和无机磷,通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定 PTA 酶活性大小。
反应式:CoA+acetyl phosphate⇋acetyl-CoA+phosphate。
[注]:全程操作需无磷环境;试剂配置最好用新的枪头和玻璃移液器等,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
磷酸转乙酰酶(PTA)活性测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
标准曲线制作过程:
1. 制备标准品母液(50μmol/mL):标准品用1mL 试剂一溶解。(母液需在两天内用)。
2. 把母液稀释成六个浓度梯度的标准品:0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. μmol/mL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3. 依据显色反应阶段测定管的加样体系操作,根据结果即可制作标准曲线。