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    • 品牌 : 通蔚生物
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产品名称 : Nb2-11大鼠淋巴瘤细胞

产品货号 :  Nb211
中文名称 :  大鼠淋巴瘤细胞 基本形态 淋巴母细胞样
培养环境 :  37℃,5%CO2,95%AIR
生长特性 :  悬浮
培养条件 :  RPMI-1640+10% FBS+10% HS+1% P/S
细胞复苏
1、从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁。
2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min。
3、弃上清,沉淀用 5-8ml 完全培养基重悬,接种 T25 培养瓶,于细胞培养箱中培养。
4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
细胞传代
1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次。
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。
3、弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代(两个 T25), 补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,放入细胞培养箱中培养。
细胞冻存
1、细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次。
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。
3、弃上清,沉淀细胞每100万加入1mL冻存液,混匀后加入冻存管中。
4、 将冻存细胞用程序降温盒放入-80℃冰箱即可;如后期要将细胞转入液氮罐中,需在-80℃冰箱存放24小时以上。