【通蔚生物】关于流式细胞仪你了解多少？

流式细胞术是一种对溶液中单个细胞或颗粒进行快速、多参数分析的技术。流式细胞仪利用激光作为光源，照射在细胞上，产生散射光和荧光信号，由检测器如光电二极管或光电倍增管读取。之后，这些信号被转换成电子信号，由计算机进行分析，并写入标准格式(.fcs)数据文件。另外，细胞群可以根据其荧光或散射光的特性进行分析或分选。
用于流式细胞术的仪器在过去的几十年里不断“进化”着，以满足越来越多的科研与临床应用需求。
传统流式细胞仪：
传统的流式细胞仪由液流、光学和电子（检测分析）三个系统组成。
液流系统：
液流系统主要由鞘液(通常是一种缓冲盐水溶液)构成。在一定压力下，鞘液将细胞或颗粒聚焦在一条直线，并将其输送到激光拦截点。
光学系统：
光学系统由激发光 (激光器)和收集光 (光电倍增管或PMTs和光电二极管)组成，产生用于分析样品的散射光和荧光信号。一系列的双色向滤光片可引导荧光到特定的探测器，以便每一个单独的荧光色素可以被检测和测量。更具体地说，双色向滤光片只允许波长较短或较长的光通过，并以一定角度反射不能通过的光。例如，450双色向长通滤光片(DLP)让波长大于450 nm的光通过滤光片，并以一定角度反射较短波长的光，发送到另一个探测器。带通滤光片只允许一定波长范围内的荧光通过。例如，450/50带通滤光片只允许波长为450 +/- 25 nm的荧光通过。
电子系统：
电子系统将探测器发出的信号转换成可以被计算机读取的数字信号。
常见的多激光系统通常有20个参数(FSC, SSC和18个荧光探测器)。目前，一些新的仪器正在引入5个或更多的激光器，并设置30-50个参数，但这并不常见。传统流式细胞仪使用的最常见的激光是488 nm(蓝色)、405nm(紫色)、532nm(绿色)、552nm(绿色)、561 nm(绿黄色)、640 nm(红色)和355 nm(紫外线)，还有一些不常见的激光可用于特定用途。此外，还有一些仪器已经用电子崩光电二极管(APD)取代光电倍增管(PMT)用于荧光检测，目的是提高检测的灵敏度。
以上是上海通蔚生物为大家简单介绍几种流式细胞仪操作，望对您的科研事业提供绵薄之力！