细胞信息
细胞名称 |
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细胞品牌 |
通蔚生物 |
种属来源 |
人 |
组织来源 |
脐带 |
生长特性 |
贴壁生长 |
细胞形态 |
梭形细胞 |
细胞简介 |
脐带间充质干细胞是一种能分化成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞的多能干细胞。其具有强大的增殖能力,且参与构成造血微环境,因此被广泛应用于组织工程,细胞治疗和基因治疗。 人脐带间质干细胞取自健康足月分娩孕妇的脐带,其拥有强大的自我更新能力并具有多向分化潜能。 脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构。原来是由羊膜包卷着卵黄囊和尿膜的柄状伸长部而形成的。脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。当卵黄囊及其血管退化,脐动脉和脐静脉就发达起来,在这些间隙中可以看到疏松的胶状的间充质。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿来的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。最后由子宫静脉将来自胎儿的代谢废物运走,某种激素和抗体等也通过脐带从母体移交给胎儿。脐带中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成机体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体;这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。间充质干细胞(MSC)是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下,可分化为多种造血细胞以外的组织细胞,并具有造血支持、免疫调节、组织修复等作用;目前,多用于风湿免疫疾病的治疗。间充质干细胞(MSCs)是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子,促进造血干细胞(HSC)的增殖与分化。MSCs还具有免疫调节、抗炎和组织修复作用,可减轻移植物抗宿主病(GVHD)及其他移植相关并发症。 |
质量检测 |
人脐带间充质干细胞纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等 |
细胞规格 |
5x10⁵cells/T25或1mL冻存管 |
培养基 |
人脐带间充质干细胞专用培养基 |
培养条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
传代特征 |
可传5代左右;3代以内状态为佳 |
传代方法 |
1:3至1:5,每周2- 3次 |
细胞货期 |
现货 ,1周左右 |
发货方式 |
复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) |
供应范围 |
仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
特别说明 |
具体操作步骤以随货产品说明书为主 |
细胞培养操作
收货处理 |
取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态 |
复苏细胞 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
细胞传代 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 |
细胞冻存 |
1. 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例; 2. a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 3. b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 4. c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
注意事项
重要提醒 |
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。 2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。 3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。 4. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 |
到货须知 |
1. 收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。 2. 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。 3. 由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。 4. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。 |
售后服务
细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 |
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 |
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 |
4. 常温发货细胞静置2小时后,干冰冻存发货细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 |
5. 常温发货的细胞静置22小时且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染经核实后,重发。 |
6. 细胞活性问题在收到产品3天内提出真实实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
细胞不予重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 |
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 |
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 |
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 |
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 |
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |
特别说明 |
上海通蔚生物客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打免费服务电话021-54845833或15800441009,我们随时给予实验中的免费解答。 |