细胞基本信息
名 称 |
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货 号 |
TW-CC3508 |
品 牌 |
通蔚生物 |
基因型 |
" MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met–, gal80Δ, URA3 : : GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ, MEL1" |
菌株简介 |
" Y187菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂,双杂实验用菌株,MATα型,可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(Y2HGold,AH109等)通过mating操作进行筛库试验。,Transformation marker为: trp1, leu2,报告基因为:lacZ, MEL1。Y187 -GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒PGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768 ~881 位氨基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4系统原理:一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1 ~ 174位氨基酸区段的DNA结合域(DNA-BD)和位于C端768 ~881 位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下,BD不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和 prey 融合蛋白(prey-AD),如果 bait 和 prey发生相互作用,就会促使 BD 和 AD 的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。Y187有两个报告基因:lacZ, MEL1,分别由两种不同的启动子(G1,M1)启动,这两种启动子只有GAL4识别的17bp核心区相同,其余部分均不同,大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率.Y187菌株可用YPDA在28℃有氧的条件下培养,使用30%的甘油保藏菌种。" |
培养基 |
YPDA |
培养条件 |
28℃,有氧,YEB |
质粒转化 |
PEG/liAC;电转 |
保存方式 |
30%甘油,-20℃ |
基本应用 |
酵母双杂交 |
供应范围 |
仅供限于科研实验研究 |
运输方式 |
低温快递运输 |
菌株优势 |
通蔚生物菌株库拥有200种菌株 , 遗传性状一致 |
特别说明 |
细胞购买/细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买,请立即与通蔚生物联系 |
售后服务 |
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细胞予重发 |
1.细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 |
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 |
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3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 |
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4.常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 |
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5.常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 |
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6.细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
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细胞不予重发 |
1.客户操作造成细胞污染,不重发。 |
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 |
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3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 |
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4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 |
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5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 |
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6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |
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特别说明 |
上海通蔚生物客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打免费服务电话021-54845833/15800441009,我们随时给予实验中的免费解答。 |