总抗坏血酸(TAA)含量测定(红菲咯啉法)微板法/96样
产品简介:
总抗坏血酸(TAA)包括还原型和脱氢型抗坏血酸,其中脱氢抗坏血酸被还原为还原型抗坏血酸,接着还原型抗坏血酸把三价铁离子还原成二价铁离子,二价铁离子与红菲咯啉反应生成红色络和物,在 534nm 处有特征吸收峰,颜色深浅与还原型抗坏血酸含量成正比,继而计算得出总抗坏血酸的含量。
试剂盒组成和配制:
试剂名称 |
规格 |
保存要求 |
备注 |
提取液 |
液体100mL×1瓶 |
4℃保存 |
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试剂 a |
液体 5mL×1 瓶 |
4℃保存 |
用前甩几下或4℃离心使试剂落入试管底部,再加入15ml的25%硫酸,混匀,4℃保存。 |
试剂 b |
液体 40mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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试剂 c |
液体 10mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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试剂一 |
液体 30mL×1 瓶 |
4℃保存 |
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试剂二 |
A:液体×1支 试剂瓶B(空瓶) |
4℃保存 |
试剂二 B 液配制:临用前取出0.047mLA 液至试剂瓶 B 中,再加9.953mL无水乙醇,混匀备用。 |
试剂三 |
粉体 mg×1 瓶 |
4℃保存 |
用前甩几下使粉体落入底部,再加 13mL 无水乙醇混匀溶解(该试剂难溶,可超声溶解)。 |
试剂四 |
液体 5mL×1 瓶 |
4℃保存 |
溶液为淡黄色。 |
标准品 |
粉剂×2 支 |
4℃保存 |
临用前:每支用前甩几下标准品管,使粉剂落入底部,再加入1mL试剂一混匀溶解 , 即 得1mg/mL,再用试剂一稀释100倍为 0.01mg/mL 溶液即为标准液(现配现用)。 |
所需的仪器和用品:
酶标仪、96 孔板、研钵、冰、低温离心机、无水乙醇、可调式移液器和蒸馏水。
总抗坏血酸(TAA)含量测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!