测定规格:24样
有 效 期:6个月
测定方法:分光光度法
保存条件:低温避光保存
产品简介:
支链氨基酸转氨酶(BCAT, E.C.2.6.1.42) 属于以磷酸吡哆醛作为辅酶的Ⅳ类转氨酶。该酶分布十分广泛,已经发现广泛存在于原核生物和大多数真核生物中。支链氨基酸转氨酶(BCAT)催化特异 L-型氨基酸氨基转移到α-酮戊二酸,形成相应的支链α-酮酸和谷氨酸;再用特异作用于谷氨酸的酶复合体分解谷氨酸,同时与显色剂反应生成黄色物质,该物质在 450nm 处有最大吸收峰,进而得到支链氨基酸转氨酶(BCAT)的酶活性大小。
该酶催化反应:L-leucine+2-oxoglutarate=4-methyl-2-oxopentanoate + L-glutamate。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、可调式移液器、研钵和蒸馏水。
支链氨基酸转氨酶(BCAT)活性检测:
建议正式实验前选取2个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
标准曲线制作过程:
1. 标准品母液(10nmol/μL)。
2. 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1. nmol/μL。也可根据实际样本来调整标准品浓度。
3. 依据显色反应阶段,测定管的加样表操作,根据结果即可制作标准曲线。