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021-54845833/15800441009
产品及特点：
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)属乳酸杆菌科，为革兰氏阳性小杆菌，可以污染食品，导致李斯特病的发病率日趋上升，临床表现主要有脑膜炎、败血性肉芽肿、淋巴结肿大等。本病遍及世界各地，是人畜共患的传染病。人类感染有增多趋势，特别是新生儿、老年人、孕妇及免疫功能低下者易感性更高。对食品中的单增利斯特菌做出快速的检测和鉴定，是预防利斯特病的有效方法，因此单核细胞增生李斯特菌的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增单核细胞增生李斯特菌，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：
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编号 |
成分 |
规格 |
|
试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 |
1mL（红盖） |
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试剂二 |
超纯水 |
1mL（亮黄色） |
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试剂三 |
单核细胞增生李斯特菌PCR引物混合液 |
100μL（白盖） |
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试剂四 |
单核细胞增生李斯特菌PCR阳性对照1×10E8 /μL |
50μL（黄盖） |
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试剂五 |
使用手册 |
1 份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品 DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加 10μL 单核细胞增生李斯特菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
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成份 |
N+2个样品管 |
PCR阴性对照 |
PCR阳性对照 |
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PCR Magic Mix 3.0 |
各20μL |
20μL |
20μL |
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单核细胞增生李斯特菌PCR引物混合液 |
各2μL |
2μL |
2μL |
|
N+2个样品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
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PCR阴性对照(水) |
-- |
18μL |
-- |
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PCR阳性对照单核细胞增生李斯特菌PCR阳性对照1000倍稀释液 |
-- |
-- |
18μL |
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过程 |
温度 |
时间 |
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预变性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反应35个循环 |
95℃ |
30 sec |
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55℃ |
30 sec |
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72℃ |
40 sec |
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最后延伸 |
72℃ |
7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
四、特别提示：
本公司的所有产品，仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
