产品简介
产品名称 :小鼠骨骼肌卫星细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :骨骼肌组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
小鼠骨骼肌卫星细胞分离自四肢肌肉组织。骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40% 。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。
依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带) 及暗带(A 带) 。
明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H 线。H 线的中部有一M 线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维(肌细胞) 外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维(肌细胞) 表面。当肌纤维(肌细胞) 受损后,肌卫星细胞可增殖分化,参与肌纤维(肌细胞) 的修复,因此具有干细胞性质。
方法简介
通蔚生物实验室分离的小鼠骨骼肌卫星细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合多次差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
通蔚生物实验室分离的小鼠骨骼肌卫星细胞经D esmin免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 :PLL(0. 1m g/ml)
培 养 基 :含FBS、马血清、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传1-3代左右
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% 。C O2,5%
小鼠骨骼肌卫星细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
小鼠骨骼肌卫星细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞可传1-3代左右。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。