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产品简介
产品名称 ： 大鼠神经少突胶质前体细胞
产品品牌 ： 通蔚生物
组织来源 ： 脑组织
产品规格 ： 5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠神经少突胶质前体细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。少突胶质细胞分布于中枢神经系统，在银浸染标本中，少突胶质细胞比星状胶质细胞小，其突起也较小而少，呈珠状，故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。少突胶质细胞(oligodendrocyte)是中枢神经系统(C N S)的成髓鞘神经胶质细胞，其发育要经历少突胶质细胞祖细胞、前少突胶质细胞祖细胞、未成熟和成熟少突胶质细胞等阶段。有学者将少突胶质细胞按其发育程度和形态分为三型。但是，细胞发育是一个连续的过程，其形态、表达产物和功能的演变没有严格的界限，因此，其分类是相对的。
这三型分别为：Ⅰ型少突胶质细胞又称前O 2A (pre-O 2A p ro genitorcell)。细胞呈圆形，表面光滑，直径约3μm，体外混合培养时成簇生长在星形胶质表面，具有很强的分裂增殖潜力，表达神经节苷脂GM 1、波形蛋白和多唾液酸—神经粘附分子(polysialic acid -neuralcellad h esionmolecule，P SA-NCAM )等。Ⅱ型少突胶质细胞胞体常有双极或三极突起，极少数为单极突起，直径约7μm ，有一定的分裂增殖能力。体外培养时为双潜能细胞，既可分化为少突胶质细胞又可分化为Ⅱ型星形胶质，故又称为少突胶质细胞-Ⅱ型星形胶质祖细胞(oligo d en d ro cyte-typ e-2astro cyte p ro genitorcell，O 2A)。O 2A除表达G M 1和波形蛋白外还表达神经节苷脂G D 3和G Q(淋巴杂交瘤株A 2B5产生G Q 的抗体)，故常用A 2B5抗体标记O 2A 。
Ⅲ型少突胶质细胞不再具有分裂增殖能力，为分裂终期细胞。直径约10μm 。根据其形成髓鞘的能力，又分为不成熟的和成熟的两类少突胶质细胞。不成熟的O L胞体常伸出4～5条较粗大突起，表面还残留有A 2B5标记物，同时也表达O 1-O 4抗原，无形成髓鞘的能力。成熟的少突胶质细胞突起有如蜘蛛网，大量表达半乳糖脑苷脂(galactocerebro side，G C )、蛋白脂蛋白(proteiolipidprotein，PLP)、髓鞘碱性蛋白(m yelin basic protein，M BP)等，有对轴突髓鞘化的能力。体外培养的少突胶质细胞前体细胞(简称少突胶质细胞前体细胞)包括前O 2A 和O 2A 和未成熟少突胶质细胞，前两者具有增殖能力。
方法简介
通蔚生物实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用胰蛋白酶消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
通蔚生物实验室分离的大鼠神经少突胶质前体细胞经A2B5免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 ： PLL(0.1m g/ml)
培 养 基 ： 含B-27、PD G F、bFG F、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ： 每2-3天换液一次
生长特性 ： 贴壁
细胞形态 ： 双极、多极形
传代特性 ： 不传代，不增殖，存活1-2周
传代比例 ： 不传代
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 ： 气相：空气，95% ；C O2，5%
大鼠神经少突胶质前体细胞体外培养周期有限；建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
大鼠神经少突胶质前体细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈双极、多极形，在通蔚生物技术部标准操作流程下，细胞不传代，不增殖，存活1-2周；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1.取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1m g/m l），明胶（0.1% ），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
