产品简介
产品名称 :大鼠肠道干细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :肠组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠肠道干细胞分离自肠道组织;肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经肛门排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。
肠道干细胞(ISC )也称肠道上皮干细胞,主要位于肠黏膜隐窝内,其与肠道黏膜上皮的更新和修复密切相关。正常情况下,位于隐窝基底部的肠道干细胞不断向隐窝顶部(肠腔方向)迁移,整个迁移过程大约3-5d,在迁移过程中肠道干细胞分化形成不同的肠黏膜细胞。当受到外界生理或病理信号作用时,ISC 可持续增殖、分化为成熟肠上皮细胞,如肠型细胞、杯状细胞、内分泌细胞和潘氏细胞等,从而维持肠道黏膜结构和功能的稳定性。
方法简介
通蔚生物实验室分离的大鼠肠道干细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化后,用肠道干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。
质量检测
通蔚生物实验室分离的大鼠肠道干细胞经M SI-1免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :悬浮 细胞形态 球形 传代特性 可传3代左右
传代比例 :1:2
消 化 液 :0.25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相:空气,95% ;C O2,5%
大鼠肠道干细胞体外培养周期有限;建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
大鼠肠道干细胞是一种悬浮细胞,细胞形态呈球形,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞可传3代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1.取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2.悬浮细胞处理
1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液。
2)1200-1500rpm 离心3min,弃上清,收集细胞沉淀。
3) 加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合密度接种至培养器皿中,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37℃温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm 离心5min,弃上清,收集细胞沉淀。
5) 加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充
新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
6) 待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。