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021-54845833/15800441009
产品简介
产品名称 ：大鼠嗅球神经元细胞
产品品牌 ：通蔚生物
组织来源 ：嗅球组织
产品规格 ：5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠嗅球神经元细胞分离自嗅球组织。嗅球是脊椎动物前脑结构中参与嗅觉的部分，用于感知气味。嗅球分为二个不同的结构：主嗅球及辅助嗅球。在大脑额叶来自许多嗅细胞的神经纤维缠集在一起，形成线球状的部分。在这里，纤维与多个次级神经元——僧帽细胞的树突相连接，进而由这里伸出神经纤维形成嗅囊，终止于额叶下方。
一般认为它在嗅味的辨别中具有重要的功能。对于大部份的脊椎动物而言，嗅球位在大脑的最前面，不过人的嗅球位于大脑的内部。嗅球由筛骨的筛板固定且保护嗅球，哺乳动物的筛板会分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神经会穿过筛板中的筛孔而连接到嗅球。嗅球分为二个不同的结构：主嗅球及辅助嗅球。
方法简介
通蔚生物实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
通蔚生物实验室分离的大鼠嗅球神经元细胞经β-Tubulin-Ⅲ免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 ：PLL(0. 1m g/ml)
培 养 基 ：含B-27 Supplem ent、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ：每2-3天换液一次
生长特性 ：贴壁
细胞形态 ：神经元细胞样
传代特性 ：属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群
传代比例 ：不传代
消 化 液 ：0. 125% 胰蛋白酶
培养条件 ：气相 ：空气，95% 。C O2，5%
大鼠嗅球神经元细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
大鼠嗅球神经元细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈神经元细胞样，在通蔚生物技术部标准操作流程下，细胞属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 静置后，显微镜下观察细胞状态，拍照记录细胞的贴壁情况，漂浮的细胞需离心收集后在离心管消化(脱落细胞处理方式) ，贴壁细胞也需消化后与脱落的细胞合并一起后重新接种。
3. 神经元细胞消化
1) 将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞(1200rpm5min) ，细胞沉淀按照下面脱落细胞处理方式处理该部分细胞。
2) 培养瓶内贴壁细胞，用PBS(37℃预热) 清洗细胞一次，将PBS收集到步骤1的离心管中，不要直接丢弃。
3) 添加0. 125% 胰蛋白酶消化液(0. 25% 胰酶用PBS稀释一倍) 1m L至培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，放入4℃冰箱消化细胞3-5min(或者37℃温浴1min ) 。
4) 倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化(稀释法终止消化，培养基用量不低于5ml) 。
5) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞，1200rpm 5min 离心去除残留胰酶。
6) 去掉上清，加入适量的完全培养基混匀(可补加1% FB S，促进贴壁) ，接种于孔板中(提前多聚赖氨酸包被孔板) 。
7) 待细胞贴壁后可用于后续相关实验。
4. 细胞收货脱落
1) 收集所有细胞悬液，1200rpm 5min离心，保留沉淀。
2) 添加0. 125% 胰蛋白酶消化液(0. 25% 胰酶用PBS稀释一倍) 1m L至离心管中，轻柔重悬沉淀，放置4℃冰箱静置3-5min ) 。
3) 消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化。
4) 经1200rpm ，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(可补加1% FBS，促进贴壁) 重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。
5) 接种后绝对静置24-48小时， 48小时后观察，否则细胞容易聚团。
5. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ （2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0. 1m g/ml），明胶（0. 1% ），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
特殊注意事项
5. 神经元细胞贴壁不牢，必须包被培养器皿。细胞遇冷易收缩脱落，所用试剂需37℃预热，室温观察时间不宜过长。
