产品简介
产品名称 :大鼠肝枯否细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :肝脏组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠枯否细胞分离自肝脏组织。肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用。肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。
肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。枯否氏细胞(K upffer细胞) 是肝脏的肝血窦内一些固定于窦壁的巨噬细胞,它能吞噬和清除大部分从肠道来的抗原微粒,并能吞噬和清除肝血窦中的细菌、异物和衰老的红细胞,并把血红蛋白分解成胆红素。此外,肝巨噬细胞也有处理抗原,诱导T细胞增殖,参与免疫调节的作用。
枯否氏细胞和一般巨噬细胞不同,枯否氏细胞不具有增加抗原免疫原性的能力,相反有消除或减弱抗原性的作用。枯否氏细胞能吞噬来自血液循环的抗原抗体复合物和其他有害物质,以消除这些物质对机体的损害。枯否细胞功能障碍可导致肠源性内毒素血症。电镜下有很多皱褶和微绒毛。
方法简介
通蔚生物实验室分离的大鼠肝枯否细胞采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心、差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
通蔚生物实验室分离的大鼠肝枯否细胞经C D 68免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :梭形、巨噬细胞
传代特性 :属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群
传代比例 :不传代
消 化 液 :利多卡因(12m M )
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
大鼠肝枯否细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
大鼠肝枯否细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、巨噬细胞,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 特殊细胞消化一
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加利多卡因(12m M ) 消化液1m L至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,37℃温浴3min(不能超过5min) 。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5m l完全培养基稀释消化液。
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,吸出细胞悬液,经1200rpm 离心5min,丢弃上清。
4) 用完全培养基重悬细胞,计数接种于相应实验器具内,待细胞完全贴壁后开始试验(预计2h 贴壁,12-24h 完全展开) 。
5) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 特殊细胞消化二
1) 若细胞无法消化,更换消化液为0. 25% 胰蛋白酶,按照上述消化一方案操作。
2) 若仍然无法消化,加入3ml完全培养基终止消化,采用无菌细胞刮,直接刮取细胞(此法不推荐,最后选择,会造成细胞机械损伤死亡) 。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。