产品简介
产品名称 :大鼠皮肤肥大细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :皮肤组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
大鼠皮肤肥大细胞分离自皮肤组织。皮肤肥大细胞广泛分布于皮肤微血管周围,分泌多种细胞因子,参与免疫调节(T 细胞、B细胞、A PC 细胞活化) 。皮肤肥大细胞表达M HC分子、B 7分子,具有A PC 功能。表达大量的IgE -Fc受体,释放过敏介质。具有弱吞噬功能,和血液的嗜碱粒细胞同样,具有强嗜碱性颗粒的组织细胞。存在于血液中的这类颗粒,含有肝素、组织胺、5-羟色胺,由细胞崩解释放出颗粒以及颗粒中的物质,可在组织内引起速发型过敏反应(炎症) 。
由于在肥大细胞上结合的IgE抗体和抗原的接触,使细胞多陷于崩坏。肥大细胞呈圆形或卵圆形,细胞核小,呈圆形或椭圆形,染色浅,位于细胞中央。细胞常成堆或单个分布于血管附近。细胞呈圆形或卵圆形,细胞质中充满大小一致、染成蓝紫色的颗粒,均匀分布在核周围。
方法简介
通蔚生物实验室分离的大鼠皮肤肥大细胞采用胶原酶-胰蛋白酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。
质量检测
通蔚生物实验室分离的大鼠皮肤肥大细胞经M C G -35免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :悬浮 细胞形态 圆形
传代特性 :属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群
传代比例 :不传代
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
大鼠皮肤肥大细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
大鼠皮肤肥大细胞是一种悬浮细胞,细胞形态呈圆形,在通蔚生物技术部标准操作流程
下,细胞属于终末分化细胞。属于不增殖细胞群。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 悬浮细胞处理
1) 收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液。
2) 1200-1500rpm 离心3min,弃上清,收集细胞沉淀。
3) 加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞。将分散好的细胞调整合适
密度接种至培养器皿中,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2) 中细胞沉淀添加0. 25% 胰蛋白酶消化液2m L至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37℃温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清) 终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞。1200rpm 离心5min,弃上清,收集细胞沉淀。
5) 加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀。按传代比例进行接种传代,然后补充
新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
6) 待细胞状态稳定后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。