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  • 人腹膜毛细血管内皮细胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目录号 : TW32146
    • 应用 : 仅供科研使用
    • 保存条件 : 低温保存
    • 货期 : 现货
    • 商品库存:100
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产品简介
产品名称 :人腹膜毛细血管内皮细胞
产品品牌 :通蔚生物
组织来源 :腹膜组织
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶

细胞简介
人腹膜毛细血管内皮细胞分离自腹膜组织。腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜,主要由间皮细胞和间质(结缔组织、纤维、毛细血管、淋巴管) 构成,藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官,能分泌黏液润湿脏器的表面,减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连。

腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜(peritoneum ) 为全身面积最大、配布最复杂的浆膜,由皮及少量结缔组织构成,薄而光滑,呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜(p arie tal-p eritoneum ) 或腹壁薄层。覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜(visc eral-p eritoneum ) 腹膜或腹膜脏层。

脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行,共同围成不规则的潜在性腔隙,称为腹膜腔(peritoneal-cavity) 。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液,在脏器活动时可减少摩擦。
腹膜的主要生理功能:
① 分泌功能。
② 吸收功能。
③ 再生能力。
④ 防御功能。
⑤ 调理功能。脏、壁腹膜都有丰富的毛细血管,毛细血管上有不同的孔径。腹膜的毛细血管和毛细血管后静脉是进行溶质交换的主要场所。

方法简介
通蔚生物实验室分离的人腹膜毛细血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法结合化学试剂抑制法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶 。

质量检测
通蔚生物实验室分离的人腹膜毛细血管内皮细胞经C D 31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息
包被条件 :PLL(0. 1m g/ml) ,明胶(0. 1%) 
培 养  基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :内皮细胞样
传代特性 :可传2-3代
传代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
人腹膜毛细血管内皮细胞体外培养周期有限。建议使用通蔚生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片

使用方法
人腹膜毛细血管内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈内皮细胞样,在通蔚生物技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和通蔚生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。