中文名称:线粒体柠檬酸(MCA)含量测试盒(分光光度法/24样)
测定方法:分光光度法
测定规格:25管/24样
保存条件:低温避光保存
有 效 期:6个月
测定方法:分光光度法
测定规格:25管/24样
保存条件:低温避光保存
有 效 期:6个月
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
CA是线粒体三羧酸循环的第一个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。
配合测定丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析丙酮酸含量、丙酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和CA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。
测定原理:
CA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与苯肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出CA的含量。
自备仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL石英比色皿、研钵和蒸馏水。