改良Harris苏木素染色液
摘要
属于常规切片HE染色的明矾苏木素的一种,适用于细胞核染色,尤其适用于临床纸片染色。
产品介绍
改良Harris苏木素染色液
产品简介:
苏木素
(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称HE染色,是病理学和组织学常用的一种染色方法。苏木 精为碱性天 然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木 精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
改良Harris苏木素染色液是经典的Harris苏木素染色法的改进。该染色液不含汞,无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris苏木素染色液,染色时间一般5~8min。其特点是苏木素被氧化的程度高,染色力强,虽然染色时间短,但是易使细胞核、细胞质、纤维过染,染色后需要盐酸乙醇分化,属于退行性染色。
染色原理:
细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天 然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是
DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一 定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的
pH值密切相关。当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在
HE染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织与色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。
返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。