作为基础培养基,DMEM培养基是Dulbecco改良的Eagle培养基。在细胞培养中,或许会接触到DMEM高糖和DMEM/F12培养基。那么,他们之间有什么区别呢?了解它们之间差异,有助于提高细胞培养的成果。
认识DMEM/F12和DMEM高糖培养基
DMEM高糖
DMEM高糖培养基是一种广泛应用于细胞培养的培养基,它是从原始的伊格尔基础培养基(BME)改良而来,并在其基础上增加了氨基酸和维生素的浓度,并提高了葡萄糖浓度。DMEM高糖培养基的原始配方含有1000mg/L葡萄糖,主要用于培养小鼠胚胎细胞。随着研究的深入,DMEM培养基经过多次改良,现在广泛用于培养各种哺乳动物细胞,包括小鼠、鸡和人类细胞。
DMEM高糖培养基的主要特点是:
1.高葡萄糖浓度:DMEM高糖培养基的葡萄糖浓度为4500mg/L,相比标准DMEM的1000mg/L增加了4.5倍,为快速增殖的细胞提供充足的能量来源。
2.高浓度的氨基酸和维生素:DMEM高糖培养基中包含比标准DMEM更高的浓度氨基酸和维生素,例如谷氨酰胺浓度为2920mg/L,丙酮酸钠浓度为110mg/L,以及其他必需的氨基酸和维生素,满足细胞生长的需要。
3.广泛适用性:DMEM高糖培养基广泛应用于培养多种类型的细胞,包括:
快速增殖的细胞:例如肿瘤细胞、杂交瘤细胞、CHO细胞等。
悬浮细胞:例如某些白血病细胞、杂交瘤细胞等。
原代细胞:例如从组织中分离的细胞。
转化细胞:例如经过基因转染的细胞。
DMEM高糖培养基的典型应用场景包括:
杂交瘤细胞培养:用于生产抗体和治疗性蛋白。例如,使用DMEM高糖培养基培养小鼠杂交瘤细胞,生产针对特定抗原的单克隆抗体。
CHO细胞培养:用于生产重组蛋白和生物制剂。例如,利用CHO细胞表达重组人促红细胞生成素(EPO),用于治疗贫血。
疫苗生产:用于生产病毒和细菌疫苗。例如,利用CHO细胞生产乙肝疫苗。
细胞治疗研究:用于培养用于细胞治疗的细胞,例如CAR-T细胞。
DMEM高糖培养基的优势在于其成分丰富、价格实惠,能够满足多种细胞类型的培养需求。然而,需要注意的是,对于一些对高浓度葡萄糖敏感的细胞类型,例如神经细胞、原代细胞,建议使用低糖DMEM或其他适合的培养基
DMEM/F12
DMEM/F12是一种广泛应用于细胞培养的基础培养基,用于促进多种哺乳动物细胞的生长,包括MDCK细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠成纤维细胞等。
DMEM/F12培养基是由DMEM培养基和Ham'sF-12培养基以1:1的比例混合而成,并对一些成分进行了优化。该配方结合了DMEM培养基中高浓度的葡萄糖、氨基酸和维生素,以及Ham'sF-12培养基中更全面的营养成分和生长因子,例如:
1.高浓度葡萄糖:提供细胞生长所需的能量来源。
2.必需氨基酸和维生素:满足细胞合成蛋白质和进行代谢活动的需要。
3.其他关键成分:包括锌、腐胺、次黄嘌呤、胸苷等,促进细胞生长和分化。
4.除了DMEM和Ham'sF-12中的成分外,DMEM/F12培养基中通常还会添加一些常见的补充剂,例如:
5.L-谷氨酰胺:细胞生长不可或缺的营养物质。
6.酚红指示剂:用于指示培养基的pH值。
由于DMEM/F12培养基本身缺乏蛋白质、脂质和生长因子,因此通常需要添加胎牛血清(FBS)来补充这些成分,为细胞提供更完整的生长环境。此外,DMEM/F12培养基使用碳酸氢钠缓冲系统,需要在5-10%的CO2环境中培养,以维持培养基的pH值稳定,并模拟细胞在体内的生长环境。
DMEM/F12培养基的优势在于:
1.营养丰富:提供了细胞生长所需的多种营养成分。
2.广泛适用性:可以用于培养多种类型的哺乳动物细胞。
3.可控性:可以通过添加不同的补充剂,来满足不同细胞类型的培养需求。
4.DMEM/F12培养基在生物医学研究、药物研发和细胞治疗等领域有着广泛的应用。例如,它被用于:
5.药物筛选:用于测试药物对细胞的毒性和有效性。
6.细胞模型构建:用于建立模拟人体组织和器官的细胞模型。
7.细胞治疗研究:用于培养用于细胞治疗的细胞。
DMEM/F12培养基是一种功能强大且用途广泛的细胞培养基,它通过结合DMEM和Ham'sF-12培养基的优点,为各种哺乳动物细胞提供了理想的生长环境,在生物医学领域发挥着重要的作用。下表是
DMEM高糖培养基和DMEM/F12培养基区别:
特性
|
DMEM高糖培养基
|
DMEM/F12培养基
|
葡萄糖浓度
|
高(通常为4.5 g/L)
|
中等(通常为1.0 g/L)
|
成分来源
|
基于Eagle的最小必需培养基(MEM)修改
|
DMEM和Ham's F-12的1:1混合
|
氨基酸
|
含有较多的氨基酸
|
含有更全面和丰富的氨基酸和其他营养成分
|
维生素
|
含有基本的维生素
|
含有更广泛的维生素
|
矿物质
|
含有基本的矿物质
|
含有多种矿物质
|
缓冲系统
|
常使用碳酸氢钠作为缓冲系统
|
包含HEPES和碳酸氢钠作为缓冲系统
|
使用细胞类型
|
常用于快速生长的细胞(如HeLa, 293T)
|
常用于慢速生长的细胞和更敏感的细胞(如原代细胞和神经细胞)
|
应用
|
广泛用于各种细胞培养和常规细胞系的生长
|
用于需要更复杂营养需求的细胞培养,如神经元和肝细胞培养
|
其他添加物
|
通常不含生长因子和激素
|
通常不含生长因子和激素
|
DMEM/F12和DMEM高糖培养基选择
选择DMEM/F12还是DMEM高糖培养基,需要根据您的具体实验需求和细胞类型来决定。以下是一些关键考虑因素:
1.细胞类型:
快速增殖的细胞:DMEM高糖培养基更适合快速增殖的细胞,例如肿瘤细胞、杂交瘤细胞、CHO细胞等。其高浓度的葡萄糖能够为这些细胞提供充足的能量,促进它们的快速生长。
对葡萄糖浓度敏感的细胞:DMEM/F12培养基更适合对葡萄糖浓度敏感的细胞类型,例如神经细胞、原代细胞等。高浓度的葡萄糖可能会对这些细胞的生长和分化产生负面影响。
其他细胞类型:对于一些特定类型的细胞,例如上皮细胞、内皮细胞等,可能需要根据具体情况选择合适的培养基。
2.实验目的:
长期培养:DMEM/F12培养基更适合长期培养,因为其低葡萄糖浓度可以减缓细胞的增殖速度,并维持细胞的稳定性。
细胞分化:DMEM/F12培养基更适合进行细胞分化实验,因为其低葡萄糖浓度可以更好地模拟细胞在体内的生长环境。
快速增殖:DMEM高糖培养基更适合需要快速增殖细胞的实验,例如肿瘤细胞增殖研究、抗体生产等。
3.培养条件:
CO2浓度:DMEM/F12培养基和DMEM高糖培养基都通常需要在5-10%的CO2环境中培养。
4.成本:
DMEM高糖:通常比DMEM/F12更便宜。
如果需要培养快速增殖的细胞,DMEM高糖培养基通常是更合适的选择。如果需要培养对葡萄糖浓度敏感的细胞,或进行长期培养、细胞分化等实验,DMEM/F12培养基更合适。
上述为大家介绍了DMEM/F12和DMEM高糖培养基区别,在细胞培养中选择合适的细胞培养基非常重要,希望上述内容对你有所帮助,可以提高您细胞培养的效率和成功。上海通蔚,品质保证!DMEM/F12营养丰富,适合多种哺乳动物细胞培养,尤其适合长期培养和细胞分化实验。DMEM高糖,专为快速增殖细胞而设计,为您的科研提供更多选择!我们价格实惠,欢迎来选购!