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细胞培养基大盘点:不同种类,不同用途

发布时间:2024-06-13     发布作者:上海通蔚生物

  上篇文章为大家介绍《常见细胞培养基及选择》。今天围绕着细胞培养基的分类为大家详细介绍下基础培养基、完全培养基和无血清培养基种类。

  基础培养基


  基础培养基的主要成份是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质(血清、生长因子、抗生素和缓冲液)。基础培养基种类很多,其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12是应用较为广泛的。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。具体特征如下:


培养基 特征
应用

M199培养基

199 号培养基,通常称为 M199,是 JF Morgan 于 1950 年开发的一种细胞培养基。有各种必需和非必需 氨基酸、葡萄糖、胆固醇、嘧啶和维生素,包括硫胺素、核黄素和生物素。

广泛的应用范围还扩展到生物制剂生产、药物筛选和毒理学研究,促进了医学和生物技术的进步。


BME培养基

BME由HarryEagle在1955年开发的,成分主要是BSS+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。

BME是一种用于 HeLa 细胞、小鼠成纤维细胞和其他人类细胞系(如 WI-38 和 MRC-5)生长的基础培养基

MEM培养基

由HarryEagle在1959年在基础Eagle培养基改良的产物,它针对性地提高了BME的氨基酸浓度,使其达到BME的两倍,并添加了一些BME中没有的必需氨基酸,例如谷氨酰胺。同时,MEM培养基将赖氨酸和生物素的浓度降低,使其成为一种“低限量”的培养基。

MEM培养基常用于培养成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞等贴壁细胞,也适用于一些悬浮细胞的培养,例如:一些淋巴细胞、白血病细胞等。

DMEM培养基

DMEM是由杜尔贝克(Dulbecco)1959年在Eagle基础培养基(MEM)上改良而成的。改良后,DMEM氨基酸和维生素的浓度提高了一倍,并补充了一些非必需氨基酸,例如甘氨酸和丝氨酸,以及铁和丙酮酸,以满足更多细胞的生长需求。

DMEM最初是为了培养小鼠成纤维细胞而设计的,后来被广泛应用于各种细胞系的培养,包括肿瘤细胞。

IMDM细胞培养基

scove在1976年对Dulbecco'sMedium进行改良,创造了Iscove'sMedium,最初用于培养骨髓细胞,特别是红细胞和巨噬细胞前体。补充了DMEM中不存在的几种非必需氨基酸和维生素(氰钴胺和生物素)以及额外的亚硒酸盐、丙酮酸盐和HEPES。添加了转铁蛋白、牛血清白蛋白和大豆脂质作为血清替代品。

可用于杂交瘤细胞和高密度细胞的快速培养。

RPMI-1640培养基

RPMI-1640培养基是在1967年由RPMI研制,主要研发人员是GeorgeE.Moore和HenryR.Hsiung。最初是为淋巴细胞设计,含BSS+21种氨基酸+维生素11种等。

RPMI-1640培养基现在已经被广泛用于培养其他类型的细胞,例如哺乳动物细胞、特殊造血细胞、杂交瘤细胞等。

Ham's F10、F12培养基

HamF10细胞培养基是由 RichardG.Ham于1963年设计,最初是为了培养 中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞) 而设计的,目的是在低血清浓度下实现CHO细胞的克隆化培养。Ham'sF12是第一个能够在无血清条件下支持单个CHO细胞克隆生长的培养基。它通过添加三种纯化血清蛋白(血清白蛋白、转铁蛋白和胰岛素)代替血清,并详细研究氨基酸和微量元素的种类和浓度,实现了这一目标。

F10适用于仓鼠、人二倍体细胞,F12适用于CHO细胞。在低血清含量下时,特别适合单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也广泛应用于癌细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等。

DMEM/F12培养基

DMEM/F-12培养基是由营养丰富的DMEM培养基和成分丰富的Ham'sF12培养基以1:1的比例混合而成。它结合了两种培养基的优点,能够提供更丰富的营养成分,也更适合在低血清或无血清的条件下培养细胞,因此可以满足多种细胞类型的要求,例如原代培养及更难养的细胞系的培养。

广泛应用于多种哺乳类细胞的培养。同时,常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养


McCoy's 5A培养基

McCoy's5A培养基是由McCoy在1959年为肉瘤细胞设计的,是改良自BasalMedium5A的一种培养基。它包含还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖,并进行了其他成分的调整和添加,使其能够支持多种类型的原代细胞的培养,例如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。

McCoy's 5A广泛用于多种类型的原代细胞的培养,如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。此外McCoy's 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系,以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养。

L15细胞培养基

L-15培养基是由Moore等人在1967年设计的。最初是为了为培养 快速增殖的肿瘤细胞 而设计的,L-15培养基的主要目的,是在没有CO2的环境下,培养快速增殖的肿瘤细胞。它采用磷酸盐缓冲体系,并用半乳糖替代了葡萄糖,以适应无CO2环境的特点。

L-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代(如胚胎和成人组织)细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等



  完全培养基


  完全培养基是在基础培养基中添加了血清、抗生素等物质,也称为含血清培养基。其中大部分细胞培养常用的是牛血清,因为牛血清中含有促进细胞增殖的各种生长因子,例如胰岛素样生长因子(IGF)、表皮生长因子(EGF)等。此外为防止污染,培养液中通常添加一定量的抗生素,例如青霉素、链霉素等。

  完全培养基根据添加血清量的多少,可分为细胞生长培养基和细胞维持培养基。细胞生长培养基通常添加高浓度血清,促进细胞快速增殖;细胞维持培养基通常添加低浓度血清,维持细胞存活和功能。

  无血清培养基


  无血清培养基是指在合成培养基的基础上引入成分明确或部分明确的血清替代成分,例如生长因子、黏附因子、激素、脂类、蛋白质等,主要由基础培养基和添加物(替代血清的补充因子)组成。其主要成分包括以下几类:

  黏附因子:约有80%的哺乳动物细胞是属于贴附型生长,一般的细胞培养基是利用血清作为其来源,在无血清培养基中,细胞黏附因子是十分重要的物质,例如纤连蛋白、层粘连蛋白等。

  生长因子:生长因子是维持细胞活性与促进细胞增生、迁移、分化等,不可或缺的要素,例如表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)等。

  酶抑制剂:贴附型细胞一般多以胰蛋白酶(trypsin)进行传代,在一般细胞培养中,血清中含有抑制胰蛋白酶的成分,例如α-1抗胰蛋白酶,所以无血清培养基必须添加胰蛋白酶抑制剂,例如大豆胰蛋白酶抑制剂或抑肽酶。

  细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,并进行逐步适应,以保证细胞的特性不发生变化。

  优点

  成分明确,避免了血清成分带来的未知影响。

  避免了血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。

  杂蛋白含量少,避免血清成分影响研究结果或产品制程,提高产品表达水平并易于纯化。

  缺点

  无血清培养基成本较高。

  并非所有的细胞都能在无血清培养基中培养。

  细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基保存和应用方面局限性很大。

  这篇文章为大家介绍了常见细胞培养基的种类,相信你对细胞培养基有所了解。培养基的选择要结合细胞的特点及实验的需要选择,如有不明白可以向厂家咨询或者查阅文献。上海通蔚有基础培养基、完全培养基和细胞专用培养基,如需了解,欢迎前来咨询我们在线顾问,价格实惠,质量保障!