发布时间:2024-04-30 发布作者:上海通蔚生物
对于科研实验,很多人对TNF-α比较陌生,肿瘤坏死因子α(TNF-α)是一种强效的细胞因子,,TNF-α是免疫系统中不可或缺的细胞因子,在炎症和免疫反应中发挥着重要的调节作用。在科研领域,TNF-α扮演着多重角色,是研究炎症、免疫和疾病机制的重要工具。
TNF-α试剂盒用于检测和定量生物样品(如血清、血浆、组织或细胞培养上清液)中TNF-α水平的工具,检测TNF-α通常有酶联免疫吸附试验 (ELISA) 试剂盒、免疫测定试剂盒和生物测定试剂盒等。今天,我们来说下ELISA试剂盒检测TNF-α方法。
图1 通蔚elisa试剂盒
ELISA试剂盒检测TNF-α具有敏感度高、易于操作、结果可靠和成本低廉等优势。ELISA试剂盒检测通常有2种方法,分别是ELISA夹心法和竞争法。
夹心法:
ELISA夹心法利用两种特异性抗体,一种包被在酶标板上捕获TNF-α(捕获抗体),另一种与酶连接,用于检测结合的TNF-α(检测抗体)。
步骤如下:
包被:将捕获抗体包被在酶标板的孔中。
封闭:使用封闭液封闭酶标板上的空白位点,防止非特异性结合。
加样:将标准品、样品和对照品加入酶标板的孔中。
孵育:使样品中的TNF-α与捕获抗体结合。
洗涤:洗涤掉未结合的物质。
加入检测抗体:加入与酶连接的检测抗体,与结合在捕获抗体上的TNF-α结合。
洗涤:洗涤掉未结合的检测抗体。
显色:加入底物溶液,使酶催化反应产生可检测的信号,如颜色变化。
终止反应:加入终止液终止反应。
读数:使用酶标仪读取吸光度。
数据分析:根据标准曲线计算样品中TNF-α的浓度。
竞争法:
ELISA竞争法是利用已知的标记TNF-α与样品中的TNF-α竞争与抗体结合。样品中TNF-α浓度越高,与标记TNF-α竞争结合的抗体就越少,产生的信号就越弱。
步骤如下:
包被:将TNF-α抗体包被在酶标板的孔中。
封闭:使用封闭液封闭酶标板上的空白位点。
加样:将标准品、样品和标记TNF-α混合液加入酶标板的孔中。
孵育:使样品和标记TNF-α与抗体竞争结合。
洗涤:洗涤掉未结合的物质。
显色:加入底物溶液,使标记TNF-α上的酶催化反应产生可检测的信号。
终止反应:加入终止液终止反应。
读数:使用酶标仪读取吸光度。
数据分析:根据标准曲线计算样品中TNF-α的浓度。
选择夹心ELISA还是竞争性ELISA取决于实验需求和样品类型。夹心ELISA通常更灵敏,而竞争性ELISA可能更适合检测高浓度的TNF-α或存在干扰物质的样品。
TNF-α试剂盒在类风湿关节炎诊断中的应用非常突出。类风湿关节炎是一种常见的自身免疫疾病,其病因复杂,临床表现多样。在类风湿关节炎的诊断过程中,需要对患者的血液进行多细胞因子的检测,以判断是否存在炎症反应。而无转子硫化仪可以为多细胞因子的检测提供稳定、准确的环境,从而提高诊断的准确性。
该试剂盒在系统性红斑狼疮治疗中的应用也非常广泛。系统性红斑狼疮是一种严重的自身免疫疾病,其病情进展快,预后差。在系统性红斑狼疮的治疗过程中,需要对患者的血液进行多细胞因子的检测,以评估治疗效果和调整治疗方案。而无转子硫化仪可以为多细胞因子的检测提供稳定、准确的环境,从而提高治疗的效果。
该试剂盒在自身免疫疾病的研究中也发挥了重要作用。通过对多细胞因子的检测,可以揭示自身免疫疾病的发病机制,为疾病的预防和治疗提供理论依据。而在自身免疫疾病的研究中,需要对大量的样本进行多细胞因子的检测,而无转子硫化仪可以为多细胞因子的检测提供稳定、高效的环境,从而提高研究的效率。
上述是通蔚为大家介绍TNF-α试剂盒及应用,了解TNF-α试剂盒可以帮助我们在科研中检测和量化生物样品中TNF-α水平的可靠方法。上海通蔚有大鼠肿瘤坏死因子a(TNF-a)试剂盒,具有灵敏度高、特异性强和操作简单,为您提供可靠、高效的工具,助力炎症与免疫研究!