牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒|

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牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒: 产品货号：tw043811; 用户评价：; 快速询价 QQ索要说明书免费咨询电话：021-54845833
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牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒试验原理：
牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒试剂盒内容及其配制

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒自备材料
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒安全性
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒操作注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒试剂的准备
1）标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。
2）洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

牛巴氏杆菌A型抗体(Pasteurella-AAb)ELISA试剂盒结果判断与分析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

用户评论 (共6条评论): 办事效率蛮高，几天，就帮我搞定了这个试剂盒，谢谢！; 盒子蛮不错，包含所需试剂，并提供了中英文双版说明书及增值税发票，很正规，销售人员的态度也谦和。; 灵敏度不错，重复性也行，试剂盒在我做的这些实验中，与国内同行的盒子相比来说，性价比挺高的，尤其是价格占有不错的优势，赞一个！; 操作挺方便的，也简单，当然，这也多亏了公司的技术人员详细的实验指导，很好，谢谢，实验也相当成功。; 实验出来的标准曲线很不错（很优美），而且价格相对合理，技术指导很到位......; 我购买了两盒，批次最新，保质期内，实验结果做出来了，货到的挺快，那么远，几天就到了，加上我做实验，一共五天就搞定了。; 经朋友介绍，购买了此公司的ELISA试剂盒，用过，还不错，实验效果很好，基本达到实验参数要求，如果，下次还做实验的话，我还买这家的，朋友这几年都在用这家的（长期订货）。

酶联生物经过不断的实验优化和改进，积累了大量的经验，拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒，能对血清及其它样本定量检测抗原，定性检测特异性抗体。优质的试剂，先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。

ELISA检测技术服务内容：
1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。

以上代测费，凡购买本公司试剂盒，我们免费代测！
凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒，您只需将需要检测的动物（Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……）种类和检测指标（白介素类、激素类）及标本数量（48T/96T）通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起，现货产品一周内将检测报告交到客户手中！
欢迎各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作，以双赢求发展，共同进步，为中国检测事业的发展积累经验。

二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本：标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

血浆：应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10%（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

尿液、胸腹水、脑脊液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.0-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

三、寄标本时需注明以下情况：
1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；3、联系方式；4、实验后标本是否寄回。

客户须知：
客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。

1.什么类型的可重复的结果都与实验得到的？
每个套件还包含获得的典型数据的图表的手册。在操作者，移液和洗涤技术，孵化时间或温度，及配套年龄的任何变化会导致不同的结果。每个用户都应该获得自己的标准曲线。
2.我一定要在同一时间运行所有的样本？
不，每个试剂盒采用stripwell微孔板。这使用户可以在不同时间分析的样品的不同的号码。
3.我是否需要运行所有我的标准和样品一式两份？
是的，重复进行以监测测定精度，并提高所得到的测定结果的可信度运行。
4.是否可以存储其他试剂比表示？
为了保证测试的适当性能，不推荐高于表示其它条件下的试剂盒组分的存储。
5.我可以使用未在试剂盒中附带推荐样品类型？
该套件已经被证实在试剂盒中附带列出的样品类型。比其他验证样品类型尚未经过测试。联系技术服务进一步的信息。
6.我可以修改协议？ BG ELISA试剂盒进行了优化，以提供最佳的结果。
修改的格式或协议可以得到不准确的和错误的结果。
7.我应该如何储存我的样品？样品应储存在-20℃或更低的温度。
对于长期储存，建议在-70℃-80℃冻结它们。
8.我的样品产生的是该测定的动态范围之外的值。我可以使用这些值？
因此建议使用落入标准曲线的范围内，只有样本值。标准曲线的范围之外的值通常是非线性的，这会导致不正确地外推值。产生值比最高标准高出样品应（进一步）稀释和试验重复进行。如果样本低于测定的范围内时，样品被认为是不可检测的。
9.我是否为空白或零标准的每一次??运行？
是的，这些都需要计算，并反映任何一天微妙而显著性能变化白天和检测，以检测。排除特定的分析问题的根源时，他们也非常有帮助。
10.我可以改变样品的体积我在试验用？
我们不建议您更改卷的，因为所有的BG套件在给定的体积设计以获得最佳性能
11.可以从不同的套件组件使用？
每个试剂盒含有具有特定批号，以确保所有的部件被最佳单独执行，以及与所有在试剂盒中的其他成分的组成。 QC测试对这些特定批次进行。这是从来没有建议使用自己的组件或组件来自其他包或供应商。
12.我的标准曲线看起来很好，但我没有我的样本中得到的信号时，我希望，为什么？
样品可能不包含的分析物。矩阵效果可能会遮蔽检测。确保如试剂盒插入物所述的推荐稀释之后。如果被推荐的稀释，检查以确保稀释正确执行。过度稀释可能会造成样品低于标准曲线的范围内。
13.为什么我必须使用450-570nm波长之间的修正？
对于ELISA测定，读取在双重波长做是为了校正光密度贡献的塑料孔中，灯和光的波动。
14.我是否需要使用平板振荡器？
可靠的结果可以在没有板振荡器来获得，但外径的通常会比用板振荡器获得的那些低。
15.你怎么建议我洗我的盘子？
如果您正在使用自动洗板机，我们建议标定定期检查，系统刷新与板洗涤缓冲液清洗前。同样为手动垫圈真。中继器或洗涤瓶也可以使用。用户应该小心，以确保所有的内容都吸板拍干的无绒纸。
16.如果我提取我的样本，我还需要遵循该工具包中插入给出的推荐的稀释？
萃取程序之后所需要的样品稀释的量将通过纯化和浓度的所使用的协议的影响而受到影响。稀释或浓缩的量将必须由最终用户来确定。
17.什么是高背景的原因是什么？
1）不适当的洗涤：检查洗涤液储量，并确保执行所有推荐的清洗步骤。
2）受污染的基材：确保没有与金属离子或试剂氧化基材的污染，使用前。在ELISA基板的开发时间分别保持额外的底物溶液。
3）底物暴露于光：暴露在光可能会导致衬底的蓝色。保持，直到准备在黑暗（小瓶）的解决方案来分配到板中。
4）错误的孵育时间/温度：一般遵循关于孵育时间和温度的测试协议。然而，如果所有的孔中都强烈，同样用在标准稀释系列没有观察到强度梯度着色，那么它可能有必要观察作为色的底物反应发展，为了使反应停止越快。
18.我的光密度均较手册中，与我的套件附带一点点更高（或更低）。为什么？
光密度是由许多的物理条件，如时间和温度的影响。我们建议您缩短或延长与底物液的最终孵化补偿。
19.什么是我应该找分析物的浓度预期？
一个给定的分析物的量可以变化，不仅从物种到物种，而且组织和细胞源之间。这种信息的最佳来源是目前的文献，很容易通过互联网在多个科学数据库访问。